(a) (i) 결핵균 (Mycobacterium tuberculosis) 특이적 유전자와 결합하는 서열번호 2 및 3의 서열을 포함하는 상보적 핵산 올리고머 및 상기 특이적 유전자와 비상보적 핵산 올리고머를 함유하는 서열번호 12 및 13의 서열을 포함하는 정방향 프라이머 및 서열번호 22 및 서열번호 23의 서열을 포함하는 역방향 프라이머;(ii) 비결핵 항산균 (non-tuberculous mycobacteria, NTM) 특이적 유전자와 결합하는 서열번호 1의 서열을 포함하는 상보적 핵산 올리고머 및 상기 특이적 유전자와 비상보적 핵산 올리고머를 함유하는 서열번호 11의 서열을 포함하는 정방향 프라이머 및 서열번호 21의 서열을 포함하는 역방향 프라이머; 및(iii) 마이코박테리아 (mycobacteria)에 존재하는 유전자와 결합하는 서열번호 3 내지 8의 서열을 포함하는 상보적 핵산 올리고머 및 상기 특이적 유전자와 비상보적 핵산 올리고머를 함유하는 서열번호 14 내지 20의 서열을 포함하는 정방향 프라이머 및 서열번호 24 내지 서열번호 29의 서열을 포함하는 역방향 프라이머; 및(b) 상기 비상보적인 핵산 올리고머와 상보적으로 결합하는 서열번호 31 내지 38의 서열을 포함하는 프로브를 포함하는, 결핵 및 비결핵 항산균을 동시에 검출하기 위한 키트.