진온바이오텍
2019 신종코로나바이러스 검출용 LAMP 프라이머 세트 및 이를 함유하는 조성물
New primer set of Loop-mediated isothermal amplification for detection of 2019 novel Coronavirus and a composition containing the same
특허 요약
본 발명은 2019 신종코로나바이러스(2019 novel Coronavirus) 검출용 LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)용 조성물 및 이의 용도에 관한 것으로, 본 발명의 LAMP 조성물을 이용한 2019 신종코로나바이러스의 검출 방법은 시료로부터 별도의 핵산 추출 및 정제 과정 없이도 간단한 실시간 등온증폭기기만으로 분자진단 검사 결과를 현장에서 1시간 이내에 확인할 수 있으므로, 현장진단검사 등에 유용하게 활용될 수 있을 것이다.
청구항
번호청구항
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서열번호 1 내지 6의 올리고뉴클레오티드 프라이머를 포함하는 2019 신종코로나바이러스(2019 novel Coronavirus)를 검출하기 위한 역전사고리매개등온증폭(Reverse transcriptional Loop-mediated isothermal amplification)용 프라이머 세트;로서,상기 프라이머 세트의 타겟이 2019 신종코로나바이러스 유전자(NCBI Reference Sequence: NC_045512.2)의 일부인 서열번호 15의 올리고뉴클레오티드인 것이 특징인 프라이머 세트.

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제1항에 따른 역전사고리매개등온증폭용 프라이머 세트를 포함하는 2019 신종코로나바이러스(2019 novel Coronavirus) 검출용 조성물.

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제1항에 따른 역전사고리매개등온증폭용 프라이머 세트 및 고리매개등온증폭 반응을 수행하기 위한 시약을 포함하는 2019 신종코로나바이러스(2019 novel Coronavirus) 검출용 키트.

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제3항에 있어서, 상기 키트는 0.11.5 %(v/v)의 Triton X-100을 포함하는, pH 6.07.0의 30~500 mM Tris로 이루어진 용해 버퍼를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 2019 신종코로나바이러스 검출용 키트.

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2019 신종코로나바이러스감염증 의심 환자로부터 분리된 생물학적 시료로부터 총 RNA를 분리하는 단계;상기 분리된 총 RNA를 주형으로 하고, 제1항의 역전사고리매개등온증폭용 프라이머 세트를 이용하여 역전사고리매개등온증폭(Reverse transcriptional Loop-mediated Isothermal Amplification) 반응으로 표적서열을 증폭하는 단계; 및상기 증폭 단계의 산물을 검출하는 단계;를 포함하는 2019 신종코로나바이러스(2019 novel Coronavirus)를 검출하는 방법.

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2019 신종코로나바이러스감염증 의심 환자로부터 분리된 생물학적 시료를 용해 버퍼로 전처리하는 단계;상기 용해 버퍼로 전처리된 시료를 제1항의 역전사고리매개등온증폭용 프라이머 세트를 이용하여 역전사고리매개등온증폭(Reverse transcriptional Loop-mediated Isothermal Amplification) 반응으로 표적서열을 증폭하는 단계; 및상기 증폭 단계의 산물을 검출하는 단계;를 포함하는 2019 신종코로나바이러스(2019 novel Coronavirus)를 검출하는 방법.

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제6항에 있어서, 상기 용해 버퍼는 0.11.5 %(v/v)의 Triton X-100을 포함하는, pH 6.07.0의 30~500 mM Tris로 이루어진 것을 특징으로 하는 2019 신종코로나바이러스(2019 novel Coronavirus)를 검출하는 방법.

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제5항 또는 제6항에 있어서, 상기 증폭 산물의 검출은 SYBR Green I을 이용한 형광 측정, 페놀 레드 지시약의 색상 변화 또는 탁색도 변화를 통해 수행되는 것을 특징으로 하는 2019 신종코로나바이러스를 검출하는 방법.