| 번호 | 청구항 |
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| 1 | 시료인 혈청 또는 혈장에 제 1 유기용매와 완충용액을 이용한 액체-액체 추출법을 수행한 후 원심분리하여 극성 수층인 하층액을 얻는 단계(단계 1);상기 단계 1에서 얻은 하층액에 혼입된 유기용매를 증발시켜 제거한 뒤, 제 2 유기용매로 제단백 처리한 후 원심분리하여 상층액을 얻는 단계(단계 2); 및상기 단계 2에서 얻은 상층액을 고성능 액체크로마토그래피-질량분석기로 정량분석하는 단계(단계 3);를 포함하고,상기 단계 1의 제 1 유기용매는 2-프로판올(2-propanol)과 헵테인(heptane)의 부피비가 1:3 내지 1:5인 혼합용매, 또는 2-프로판올(2-propanol)과 헥세인(hexane)의 부피비가 1:1 내지 1:2인 혼합용매이고,상기 단계 1의 완충용액은 염석효과(salting-out effect)를 일으키는 것으로 암모늄 아세테이트 수용액이고,상기 단계 1의 완충용액과 제 1 유기용매의 부피비는 1:20 내지 1:10이고,상기 단계 3에서 액체크로마토그래피의 컬럼은 HILIC(Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography)이고,상기 단계 3의 액체크로마토그래피의 이동상 조성은 이동상 A로서 0.09 |
| 2 | 제 1항에 있어서,상기 이동상 A 및 이동상 B의 기울기 용리(gradient)는 하기의 이동상 농도구배 조건으로 실시하는 것을 특징으로 하는 방법.003c#이동상 농도구배 조건003e#- 시작~ 2분 : 이동상 A 25 부피%에서 90 부피%로 증가- 2분 ~ 4분 : 이동상 A 90 부피% 유지- 4분 ~ 4.5분 : 이동상 A 90 부피%에서 25 부피%로 감소- 4.5분 ~ 10분 : 이동상 A 25 부피%로 유지 |
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| 6 | 제 1항에 있어서,상기 단계 2의 제단백 처리는 제 2 유기용매로 아세토니트릴을 가하여 단백질을 침전시켜 제거하는 것을 특징으로 하는 방법. |
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| 8 | 제 1항에 있어서,상기 포름산은 0.1% 농도의 포름산인 것을 특징으로 하는 방법. |
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| 11 | 제 1항에 있어서,상기 단계 3의 이동상의 속도는 0.25㎖/min인 것을 특징으로 하는 방법. |
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