헬리코박터 파이로리의 편모Ａ 단백질의 사람 항혈청에반응하는 항원결정기재조합 단백질 및 그의 제조방법
Production of the antigenic epitope recombinant protein of Helicobacter pylori FlaA reactive to human antisera and its method
특허 요약
본 발명은 헬리코박터 파이로리 감염의 혈청학적 진단을 목적으로 헬리코박터 파이로리(Helicobacter pylori)가 생성하는 편모A 단백질 중 사람에게서 항원성을 보이는 항원결정기만 생성하는 헬리코박터 파이로리 편모A 단백 항원결정기재조합 단백질 제조방법에 관한 것이다. 이차원전기영동과 면역블롯 분석법으로 헬리코박터 파이로리 항원결정기를 맵핑(mapping)하여 편모A 단백질 중 환자의 혈청과 강하게 반응하는 항원결정기재조합 단백질을 제조하고, 헬리코박터 파이로리 혈청학적 진단에 사용할 수 있는 새로운 항원 성분을 제공하여 헬리코박터 파이로리의 혈청학적 진단법 개발의 폭을 넓힘으로써 위ㆍ십이지장 질환의 보건관리를 보다 향상시킬 수 있으며, 다양한 혈청학적 검색법에 대한 항원의 적용성을 증대시켜 항원 성분의 이용을 용이하게 하는 장점이 있다. 헬리코박터 파이로리, 항원결정기재조합 단백질, 편모단백질, 혈청학적 진단
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  1. 헬리코박터 파이로리 항원 유전자와 항원결정기 부분 유전자 절편을 증폭하는 단계;
  2. 상기 증폭된 유전자 절편을 서브-클로닝 하여 클론을 얻은 후, 제한효소를 처리하여 절단하는 단계;
  3. 상기 절단된 유전자 절편을 분리한 후, 정제하는 단계;
  4. 상기 2) 단계에서 처리한 동일한 제한효소를 벡터에 처리하는 단계;
  5. 상기 3) 단계의 정제된 유전자 절편과 상기 4) 단계의 벡터를 클로닝 하여 클론을 얻는 단계;
  6. 상기 5) 단계의 클론을 단백질 발현시켜 항원성을 조사하고 항원결정기 서열을 맵핑하는 단계;
  7. 상기 6) 단계의 맵핑된 항원결정기 서열에 발현단백질의 수용화를 위해 서열번호 14와 서열번호 15의 염기서열로 구성되는 프라이머 세트를 추가로 삽입하여 증폭한 후, 융합대상 벡터와 클로닝 하여 클론을 얻는 단계; 및
  8. 상기 7) 단계의 클론을 발현하여 발현단백질을 얻는 단계: 를 포함하는 헬리코박터 파이로리 편모A 단백 항원결정기재조합 단백질의 제조방법.
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