광감각제를 함유하는 세포, 이의 제조방법 및 이의 용도
Photosensitizer labeled cell, preparation method thereof and use thereof
특허 요약
본 발명은 빛에 의해 일항산소를 생성할 수 있는 광감작제를 함유하는 세포, 이의 제조방법 및 이의 용도에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 대식세포 또는 간엽줄기세포에 광감각제들을 화학적 결합, 항원-항체 결합 또는 세포내재화와 같은 방법에 의해 접합시키거나 또는 세포 내부에 봉입시킨 광감각제를 함유하는 세포를 제공하며, 상기 광감각제를 함유하는 세포는 정맥 주사 시 암 부위에 축적되며 특정 파장의 광원을 조사 시 대식세포 또는 간엽줄기세포가 사멸하면서 국소적인 면역반응을 촉진시켜 암세포를 사멸시킬 수 있어 암 면역치료제로서 유용하게 사용될 수 있다.
청구항
번호청구항
12

청구항 1에 있어서, 상기 광감각제를 함유하는 세포는 디벤조사이클로옥텐을 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

1

폴리에틸렌글리콜 및 광감각제로 이루어진 접합체; 및사람으로부터 분리된 간엽줄기세포를 포함하며, 상기 접합체는 상기 세포의 표면과 화학적 결합하는 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

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3

청구항 1에 있어서, 상기 광감각제는 빛에 의해 일항산소를 생성하는 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

4

청구항 1에 있어서, 상기 광감각제는 포르피린계(phorphyrins) 화합물, 클로린계(chlorins) 화합물, 박테리오클로린계(bacteriochlorins) 화합물, 프탈로시아닌계(phthalocyanines) 화합물, 나프탈로시아닌계(naphthalocyanines) 화합물 및 5-아미노레불린 에스테르계(5-aminolevuline esters) 화합물로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

5

청구항 1에 있어서, 상기 광감각제는 페오포르바이드(pheophorbide a), 클로린(chlorin e6) 및 포르피린(protoporphyrin IX)으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

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7

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8

청구항 1에 있어서, 상기 폴리에틸렌글리콜은 1차 아민기(-NH2), 하이드록시기(-OH) 및 카르복실기(-COOH)로 이루어진 군에서 선택된 동종 또는 이종의 관능기를 둘 이상 포함하는 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

9

청구항 1에 있어서, 상기 폴리에틸렌글리콜은 2개의 1차 아민기(-NH2)를 갖는 폴리에틸렌글리콜; 2개의 하이드록실기(-OH)를 갖는 폴리에틸렌글리콜; 1개의 1차 아민기(-NH2)와 1개의 카르복실기(-COOH)를 갖는 폴리에틸렌글리콜; 1개의 카르복실기(-COOH)와 1개의 하이드록실기(-OH)를 갖는 폴리에틸렌글리콜; 및 1개의 하이드록실기(-OH)와 1개의 아민기(-NH2)를 갖는 폴리에틸렌글리콜;로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

10

청구항 1에 있어서, 상기 폴리에틸렌글리콜은 중량평균분자량이 2,000 내지 10,000인 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

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청구항 1에 있어서, 상기 광감각제를 함유하는 세포는 세포가 광감각제 및 폴리에틸렌글리콜이 결합된 접합체와 결합하며, N,N-디사이클로헥실카르보디이미드(N,N-dicyclohexylcarbodiimide; DCC) 및 N-하이드록시숙신이미드(N-hydroxysuccinimide; nhs)와 반응시켜 활성화된 접합체가 세포 표면에 존재하는 아민기와 아마이드 결합을 통해 결합하는 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

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청구항 12에 있어서, 상기 디벤조사이클로옥텐은 1차 아민기(-NH2) 또는 카르복실기(-COOH) 중 어느 하나의 관능기를 포함하는 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

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청구항 1에 있어서, 상기 광감각제를 함유하는 세포는 세포가 광감각제, 폴리에틸렌글리콜 및 디벤조사이클로옥텐이 결합된 접합체와 결합하며, 세포 표면에 존재하는 글리칸을 아자이드로 개질한 후 디벤조사이클로옥텐의 관능기와 결합하는 것을 특징으로 하는, 광감각제를 함유하는 세포.

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폴리에틸렌글리콜과 광감각제를 반응시키는 단계(제1단계);상기 제1단계에서 얻은 폴리에틸렌글리콜-광감각제 접합체를 디벤조사이클로옥텐과 반응시키는 단계(제2단계);사람으로부터 분리된 간엽줄기세포 표면의 글리칸에 아자이드(azide)를 부여하는 단계(제3단계); 및상기 제2단계에서 얻은 디벤조사이클로옥텐-폴리에틸렌글리콜-광감각제 접합체를 상기 아자이드가 부여된 세포와 접합시키는 단계(제4단계)를 포함하는 광감각제를 함유한 시험관(in vitro)에서 세포를 제조하는 방법.

19

청구항 18에 있어서, 상기 제1단계 이전에, 상기 광감각제를 N,N-디사이클로헥실카르보디이미드(N,N-dicyclohexylcarbodiimide; DCC) 및 N-하이드록시숙신이미드(N-hydroxysuccinimide; nhs)와 반응시켜 활성화 시킨 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 광감각제를 함유하는 시험관(in vitro)에서 세포를 제조하는 방법.

20

청구항 18에 있어서, 상기 제1단계 이후에, 제1단계에서 얻은 폴리에틸렌글리콜-광감각제 접합체 중 폴리에틸렌글리콜과 광감각제의 1 대 1 당량 반응산물만을 분리 및 정제하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 광감각제를 함유하는 시험관(in vitro)에서 세포를 제조하는 방법.

21

청구항 18에 있어서, 상기 제2단계 이전에, 상기 디벤조사이클로옥텐을 N,N-디사이클로헥실카르보디이미드(N,N-dicyclohexylcarbodiimide; DCC) 및 N-하이드록시숙신이미드(N-hydroxysuccinimide; nhs)와 반응시켜 활성화 시킨 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 광감각제를 함유하는 시험관(in vitro)에서 세포를 제조하는 방법.

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청구항 18에 있어서, 상기 제3단계는 4개의 아세틸기를 갖는 만노스(AC4ManNAz)를 세포와 함께 배양하여 세포 표면의 글리칸에 아자이드를 부여하는 것을 특징으로 하는 광감각제를 함유하는 시험관(in vitro)에서 세포를 제조하는 방법.

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폴리에틸렌글리콜과 광감각제를 반응시키는 단계(제1단계);상기 제1단계에서 얻은 폴리에틸렌글리콜-광감각제 접합체를 N,N-디사이클로헥실카르보디이미드(N,N-dicyclohexylcarbodiimide; DCC) 및 N-하이드록시숙신이미드(N-hydroxysuccinimide; nhs)와 반응시켜 활성화 시킨 단계(제2단계); 및상기 활성화된 폴리에틸렌글리콜-광감각제 접합체를 사람으로부터 분리된 간엽줄기세포와 접합시키는 단계(제3단계)를 포함하는 광감각제를 함유한 시험관(in vitro)에서 세포의 제조방법.

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26

청구항 1에 따른 광감각제를 함유하는 세포를 유효성분으로 포함하는 암 치료를 위한 면역증강용 약학조성물.

27

청구항 26에 있어서, 상기 광감각제를 함유하는 세포는 암 부위에 선택적으로 축적되어, 광원 조사시 상기 세포의 선택적 사멸을 유도함으로써, 사이토카인 생성을 증가시키고 살생 T 세포(killer T cell)를 모집(recruit)하는 면역반응에 의해 항암 효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 암 치료를 위한 면역증강용 약학조성물.

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청구항 26에 있어서, 상기 암은 뇌종양, 양성성상세포종, 악성성상세포종, 뇌하수체 선종, 뇌수막종, 뇌림프종, 핍지교종, 두개내인종, 상의세포종, 뇌간종양, 두경부 종양, 뇌종양, 후두암, 구인두암, 비강/부비동암, 비인두암, 침샘암, 하인두암, 갑상선암, 구강암, 흉부종양, 소세포성 폐암, 비소세포성 폐암, 흉선암, 종격동 종양, 식도암, 유방암, 남성유방암, 복부종양, 위암, 간암, 담낭암, 담도암, 췌장암, 소장암, 대장암, 항문암, 방광암, 신장암, 전립선암, 고환암, 자궁암, 자궁경부암, 자궁내막암, 난소암, 자궁육종, 편평상피세포암 및 피부암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 암 치료를 위한 면역증강용 약학조성물.

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청구항 1, 청구항 3 내지 청구항 5, 청구항 8 내지 청구항 14 중 어느 한 항에 기재된 광감각제를 함유하는 세포를 유효성분으로 포함하며, 상기 광감각제를 함유하는 세포가 암 부위에 선택적으로 축적되어, 광원 조사시 상기 세포의 선택적 사멸을 유도함으로써, 사이토카인 생성을 증가시키고 살생 T 세포(killer T cell)를 모집(recruit)하는 면역반응에 의해 항암 효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 광역학 항암 치료용 약학조성물.