라이스 캘러스를 이용한 BMP 10 단백질 생산 방법
BMP 10 PROTEIN PRODUCING METHOD USING RICE CALLUS
특허 요약
본 발명은 라이스 캘러스를 이용한 BMP 10 단백질 생산 방법에 관한 것으로, 구체적으로 벼(Oryza sp.)의 캘러스를 유도시키는 단계; 상기 벼의 캘러스 및 BMP10 유전자를 포함하는 벡터로 형질전환된 아그로박테리움 균주를 공동 배양하는 단계를 포함하고, 상기 공동 배양 단계는 PVP(polyvinyl pyrrolidone), 플루로닉 F68, 만니톨 및 소르비톨로 구성된 군으로부터 하나 이상을 포함하는 배지에서 수행되는 것을 특징으로 하는, 라이스 캘러스를 이용한 BMP 10 단백질 생산 방법을 제공한다.
청구항
번호청구항
1

벼(Oryza sp.)의 캘러스를 유도시키는 단계;상기 벼의 캘러스, 및 BMP 10(Bone Morphogenetic Protein 10) 유전자를 포함하는 벡터로 형질전환된 아그로박테리움 균주를 공동 배양하는 단계를 포함하고, 상기 공동 배양 단계는 PVP(polyvinyl pyrrolidone), 플루로닉 F68 및 소르비톨을 포함하는 배지에서 수행되는 것을 특징으로 하는, 라이스 캘러스를 이용한 BMP 10(Bone Morphogenetic Protein 10) 단백질 생산 방법.

2

삭제

3

제1항에 있어서,상기 PVP(polyvinyl pyrrolidone)는 3.6 g/L의 농도로 첨가되고, 상기 플루로닉 F68는 2.0 g/L의 농도로 첨가되고, 상기 소르비톨은 최종 농도가 40 mM가 되도록 첨가되는 것을 특징으로 하는, 라이스 캘러스를 이용한 BMP 10(Bone Morphogenetic Protein 10) 단백질 생산 방법.

4

제1항에 있어서, 상기 벼는 동진벼인 것을 특징으로 하는, 라이스 캘러스를 이용한 BMP 10(Bone Morphogenetic Protein 10) 단백질 생산 방법.

5

제1항에 있어서,상기 아그로박테리움 균주는 아그로박테리움 투메파시네스(Agrobacterium tumefaciens), 아그로박테리움 리조게네스(Agrobacterium rhizogenes), 아그로박테리움 라디오박터(Agrobacterium radiobacter), 아그로박테리움 루비(Agrobacterium rubi), 아그로박테리움 비티스(Argobacterium vitis) 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 라이스 캘러스를 이용한 BMP 10(Bone Morphogenetic Protein 10) 단백질 생산 방법.

6

제1항에 있어서,상기 벼의 캘러스는 수크로스 5 g/L 및 최종 농도가 25 μM인 IBA(Indolebutyric acid)를 포함하는 MS 배지에서 증식되는 것을 특징으로 하는, 라이스 캘러스를 이용한 BMP 10(Bone Morphogenetic Protein 10) 단백질 생산 방법.

7

제1항에 있어서,상기 벼의 캘러스를 유도시키는 단계 이후에, 상기 유도된 캘러스를 균질화하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 라이스 캘러스를 이용한 BMP 10(Bone Morphogenetic Protein 10) 단백질 생산 방법.

8

제7항에 있어서,상기 균질화 단계는 펙티나아제를 포함하는 배지에서 상기 캘러스를 배양하는 단계 및 마세로자임 및 프롤린을 포함하는 배지에서 상기 캘러스를 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 라이스 캘러스를 이용한 BMP 10(Bone Morphogenetic Protein 10) 단백질 생산 방법.

9

제1항에 있어서,상기 공동 배양은 10L 바이오리액터에서 수행되는 것을 특징으로 하는, 라이스 캘러스를 이용한 BMP 10(Bone Morphogenetic Protein 10) 단백질 생산 방법.