시상하부-뇌하수체 바이오칩 및 이의 제조방법
Hypothalamic-pituitary biochip and manufacturing method thereof
특허 요약
본 발명은 3차원 시상하부-뇌하수체 바이오칩 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 3차원 시상하부-뇌하수체 바이오칩에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
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제6항에 있어서, 상기 피브리노겐은 4555 mg/ml, 트롬빈은 46 U/ml로 각각 포함되는 것인, 제조방법.

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제1항에 있어서, 상기 2)의 혈관 채널은 혈관 내피 세포로 코팅된 것인, 제조방법.

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  1. 시상하부-뇌하수체 칩 플랫폼용 몰드를 3D 프린팅하고, PDMS(Polydimethylsiloxane)를 몰드에 주입한 후 실온에서 중합하는 단계;2) 시상하부 챔버 및 뇌하수체 챔버에 각각 시상하부 세포, 뇌하수체 세포 및 생분해성 천연고분자와 혈액응고인자를 융합하고, 상기 각 챔버 사이를 혈관 채널로 연결하는 단계; 및 3) 신경전구 세포, 성상 세포 및 소교 세포로 이루어진 뇌 세포를 천연고분자와 혼합하고, 상기 시상하부와 뇌하수체 챔버 및 이들을 상호 연결하는 혈관 채널의 주변 공간에 로딩하는 단계;를 포함하는 3차원 시상하부-뇌하수체 바이오칩 제조방법.
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제1항에 있어서, 상기 1)의 PDMS로 제작된 칩 플랫폼은 역삼각형 모양의 시상하부 챔버 및 원형모양의 뇌하수체 챔버로 구획된 것인, 제조방법.

3

제1항에 있어서, 상기 1)의 몰드는 PLA(polylactic acid) 기반의 3D 프린팅 기술을 활용한 것을 특징으로 하는, 제조방법.

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제1항에 있어서, 상기 2)의 생분해성 천연고분자는 콜라겐과 히알루론산으로 이루어진 것인, 제조방법.

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제4항에 있어서, 상기 콜라겐 및 히알루론산은 각각 23~25 mg/ml 포함되는 것인, 제조방법.

6

제1항에 있어서, 상기 2)의 혈액응고인자는 피브리노겐과 트롬빈으로 이루어진 것인, 제조방법.

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제1항에 있어서, 상기 제조된 시상하부 챔버 및 뇌하수체 챔버에서 GnRH(gonadotropin-releasing hormone, 생식샘자극호르몬 분비호르몬), LH(luteinizing hormone, 황체형성호르몬) 및 FSH(follicle-stimulating hormone, 난포자극호르몬)가 생산 및 분비된 것을 특징으로 하는, 제조방법.

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제1항에 있어서, 상기 시상하부 챔버 내 내장된 세포가 ER(estrogen receptor, 에스트로겐 수용체) 및 PR(progesterone receptor, 프로게스테론 수용체)을 발현한 것을 특징으로 하는, 제조방법.

13

제1항에 있어서, 상기 뇌하수체 챔버 내 내장된 세포가 GnRH 수용체를 발현한 것을 특징으로 하는, 제조방법.

14

제1항에 있어서, 상기 2) 단계 이후에 시상하부 세포 및 뇌하수체 세포에 각각 독성 마커 SERPINB2-형광 발색 유전자를 삽입한 리포터를 추가로 탑재한 것인, 제조방법.

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제14항에 있어서, 상기 시상하부 세포에 탑재한 리포터는 SERPINB2-GFP 리포터인 것인, 제조방법.

16

제14항에 있어서, 상기 뇌하수체 세포에 탑재한 리포터는 SERPINB2- mCherry 리포터인 것인, 제조방법.

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제1항 내지 제8항 및 제11항 내지 제16항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 3차원 시상하부-뇌하수체 바이오칩.