카본블랙 나노입자의 분석방법
Analysis method of carbon black nanoparticle
특허 요약
본 발명은 카본블랙 나노입자의 정량분석에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 단백질 가수분해 효소(Proteinase K)의 반응성 및 특성을 분석하여 장기 조직에 대한 분해능을 높여 장기 조직에 흡착된 카본블랙 나노입자의 정량 분석에 대한 정확도를 높이는 효과를 발휘할 수 있도록 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
1

장기 조직 시편을 준비하는 단계;상기 장기 조직 시편과 버퍼액을 혼합한 1차 혼합물을 제조하는 단계;상기 1차 혼합물에 카본블랙 표준용액을 첨가하여 2차 혼합물을 제조하는 단계;상기 2차 혼합물에 단백질 가수분해 효소를 첨가하여 상기 장기 조직 시편을 분해하는 단계; 및분해된 장기 조직 시편에 대해 흡광도를 측정하여, 흡착된 카본블랙 나노입자를 분석하는 단계; 를 포함하고,상기 버퍼액은 Tris-HCl pH 8.00 버퍼에 도데실 황산나트륨(SDS)을 혼합하여 사용하고, 상기 장기 조직 시편을 분해하는 단계는,상기 단백질 가수분해 효소를 첨가한 후, 0.5 내지 1.5 분간 1차 초음파 처리하는 단계;1차 초음파 처리된 내용물을 반응시키는 단계;반응이 완료된 반응물을 원심분리하는 단계; 및원심분리 후에 상층액을 제거한 후 증류수를 혼합하여 분해된 장기조직 시편을 수득하는 단계; 를 포함하고,상기 원심분리는, 16,000 RCF(g), 30분 동안 스핀 다운(spin down)으로 수행되는 것을 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.

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제1항에 있어서, 상기 장기 조직 시편은, 폐, 간, 비장 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 장기 조직으로부터 수득된 것을 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.

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제1항에 있어서,상기 1차 혼합물은, 볼텍스 믹서(vortex mixer)로 3 내지 7초간 교반하는 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.

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제1항에 있어서,상기 단백질 가수분해 효소는, 프로테이나제 K(Proteinase K) 인 것을 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.

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제5항에 있어서,상기 프로테이나제 K(Proteinase K)는, 트리티라키움 알붐(Tritirachium album)(≥ 30 Units/mg) 으로부터 제조된 것을 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.

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제1항에 있어서,상기 단백질 가수분해 효소는, 상기 장기 조직 시편 100 중량부에 대하여 0.05 내지 0.15 중량부로 첨가되는 것을 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.

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제1항에 있어서,상기 반응은, 54 내지 58 ℃의 수조(water bath)에서 22 내지 26 시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.

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제1항에 있어서,상기 분해된 장기조직 시편을 수득하는 단계에서,상기 증류수를 혼합한 분해된 장기조직 시편을 2차 초음파 처리를 수행하는 것을 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.

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제11항에 있어서,상기 2차 초음파 처리는, 팁 소니케이터(tip sonicateor)를 사용하여 수행되는 것을 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.

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제1항에 있어서,상기 카본블랙 나노입자를 분석하는 단계는, 750 nm로 분광광도계 흡광도 변화를 측정하여 카본블랙 나노입자의 검출 농도를 분석하는 것을 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.

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제13항에 있어서,상기 카본블랙 나노입자의 검출 한계 농도는, 0.195 내지 100 ug/mL 의 범위를 갖는 것을 특징으로 하는, 카본블랙 나노입자의 분석방법.