헬리코박터 필로리(Helicobacter pylori)의 주요 병원성 인자인 s1m1 vacA gene과 s2m2 vacA gene으로부터 각각 m1 VacA와 m2 VacA를 E.coli에 발현시켜 정제해낸 단백질을 포함하는 항원으로 면역된 산란계가 생산하는 계란의 난황으로부터 얻어지는 항-헬리코박터 필로리(anti-Helicobacter pylori)에 대한 항체를 포함하는 헬리코박터 필로리의 감염 진단용 조성물.

제1항에 있어서, 상기 항원은 pET41b, ATCC49503의 VacA 유전자, ATCC 43504의 VacA 유전자를 이용하여 증폭할 프라이머를 디자인하는 단계; 증폭하려는 VacA 유전자를 PCR을 통해 증폭하는 단계; 상기 pET 41b와 PCR 산물을 각각 재조합 효소 XhoI와 NdeI를 사용하여 절단하는 단계; 상기 절단물을 결찰시킨 후 ECOS 101 반응력있는 세포에 형질전환시켜 도 1의 플라스미드 지도를 갖는 pVAC 953을 생산하는 단계; 얻어진 pVAC 953을 E.coli에 형질 전환시키는 단계; 형질전환된 pVAC953을 소유한 E.coli 콜로니를 배지에 접종하여 배양후 균체 배양액으로부터 단백질 발현을 유도하는 단계; 단백질 발현이 유도된 콜로니로부터 균체를 수거하여 현탁후 효소 반응시키는 단계; 상기 균체를 파쇄한 후 상등액을 수거하여 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 C-말단 부위에 8개의 히스티딘 잔기가 연결된 재조합 VacA 단백질을 용출시키는 단계; 분리된 단백질 액으로부터 컬럼 크로마토그래피를 재수행하고 최종 재조합 VacA 단백질을 용출시키는 단계; 얻어진 재조합 VacA 단백질 용출액을 농축한 다음 50kDa 이하의 단백질은 여과시키고 그 이상의 단백질은 농축하는 단계; 및 상기 재농축 항원과 아쥬반트를 혼합하는 단계; 를 거쳐 제조되는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 상기 결찰은 16 ℃ 내지 30 ℃ 에서 30분 내지 12시간 반응시키는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 상기 배지는 100 ml의 0.5% 글루코오스-30 ㎍/ml 카나마이신-TB (1.2% 트립톤, 0.6% 효모 추출물, 0.4% 글리세롤, 0.231% KH2PO4, 1.254% K2HPO4)를 사용하는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 상기 배양은 20℃ 의 저온 배양 조건하에 수행하는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 상기 균체 배양액의 최종 농도가 0.1 mM 이 되도록 IPTG (isopropyl-D-thiogalactopyranoside)를 첨가하여 단백질의 발현을 유도하는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 상기 수거한 균체의 현탁시에는 단백질 추출 완충액으로서 0.5M NaCl, 0.5 % NP-40(Nonidet P40), 5 % 글리세롤, PMSF, EDTA가 포함된 트리스-염산 완충액 (pH 7.9) 으로된 조성액을 사용하는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 상기 효소 반응은 라이소자임 0.5mg/ml 를 사용하여 수행하는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 상기 효소 반응된 균체는 급속 냉동 및 해동을 번갈아 수행하는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 파쇄된 균체에 MgCl2와 DNAse 를 반응시켜 균체 파쇄액의 점액성을 제거하는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 상기 컬럼 크로마토그래피 처리시 이미다졸을 사용하여 재조합 VacA 단백질을 용출시키는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 얻어진 재조합 VacA 단백질 용출액을 농축한 다음 50kDa 이하의 단백질은 여과시키고 그 이상의 단백질은 농축한 다음 얻어진 농축물을 PBS(phosphate buffered saline) 로 용해시키는 단계; 를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제2항에 있어서, 상기 아쥬반트로는 프로운드 (Freund) 완전(불완전) 보조제 (Sigma), 혹은 합성이 가능한 메틸화되지 않은 사이토신과 구아닌 모티프를 갖는 올리고뉴클레오티드(CpG-ODN)를 사용하는 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제 1항에 있어서, 상기 항원은 보조제로서 미네랄 오일을 더욱 포함하며, 아쥬반트와 보조제의 혼합 비율이 8:2～2:8인 것을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

제 1항에 있어서, 상기 항체는 난황과 물을 1:5 ～ 1:10으로 혼합한 다음, 원심분리시켜 난황 수용성 단백분획을 회수하여 분리됨을 특징으로 하는, 진단용 조성물.

헬리코박터 필로리(Helicobacter pylori)의 주요 병원성 인자인 s1m1 vacA gene과 s2m2 vacA gene으로부터 각각 m1 VacA와 m2 VacA를 E.coli에 발현시켜 정제해낸 단백질을 포함하는 항원으로 면역된 산란계가 생산하는 계란의 난황으로부터 얻어지는 항-헬리코박터 필로리(anti-Helicobacter pylori)에 대한 항체를 유효성분으로 함유하는 헬리코박터 필로리에 의하여 유발되는 위장질환에 대한 예방 또는 치료용 약학 조성물.

헬리코박터 필로리(Helicobacter pylori)의 주요 병원성 인자인 s1m1 vacA gene과 s2m2 vacA gene으로부터 각각 m1 VacA와 m2 VacA를 E.coli에 발현시켜 정제해낸 단백질을 포함하는 항원으로 면역된 산란계가 생산하는 계란의 난황으로부터 얻어지는 항-헬리코박터 필로리(anti-Helicobacter pylori)에 대한 항체를 유효성분으로 함유하는 식품.

제 17항에 있어서, 상기 항체의 양은 상기 식품 총 중량의 0.05%～5중량% 함유된 것을 특징으로 하는 식품.

제 17항에 있어서, 상기 식품은 요구르트, 계란, 제과, 사탕, 발효유, 아이스크림, 제빵, 조제분유, 음료, 마가린, 버터, 또는 치즈, 비타민C 첨가 인 것을 특징으로 하는 식품.