플라즈몬 금속 나노입자를 이용한 세포핵 내 단백질 검출방법
Method of detecting protein within a nucleus using plasmonic metal nanoparticle
특허 요약
본 발명은 세포핵 내부에 검출 대상 단백질들을 포함하는 세포에 상기 단백질에 대한 항체와 플라즈몬 금속 나노입자의 결합체를 포함하는 프로브를 처리하는 단계; 상기 세포에 대한 프로브의 산란 이미지와 파장에 따른 스펙트럼을 얻는 단계; 및 상기 스펙트럼을 분석하여 상기 단백질들의 분포 정보를 획득하는 단계;를 포함하는, 세포핵 내 단백질 검출 방법에 관한 것이다.
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세포핵 내부에 검출 대상 단백질들을 포함하는 세포에 상기 단백질에 대한 항체와 플라즈몬 금속 나노입자의 결합체를 포함하는 프로브를 처리하여 상기 단백질에 항체를 통해 결합된 플라즈몬 금속 나노입자들을 플라즈몬 커플링 효과를 나타내도록 근접하게 위치시키는 단계;상기 세포에 프로브의 산란 이미지와 상기 플라즈몬 금속 나노입자간의 플라즈몬 커플링 효과에 따른 파장에 따른 스펙트럼을 얻는 단계; 및상기 스펙트럼을 분석하여 상기 단백질들의 분포 정보를 획득하는 단계;를 포함하고,상기 단백질은 노화 과정 중에서 재분포되는 이질염색질의 마커로서의 수식화된 히스톤인 것을 특징으로 하는, 세포핵 내 단백질 검출 방법.

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세포핵 내부에 검출 대상 단백질들을 포함하는 세포에 상기 단백질에 대한 항체와 플라즈몬 금속 나노입자의 결합체로 구성된 프로브를 처리하여 상기 단백질에 항체를 통해 결합된 플라즈몬 금속 나노입자들을 플라즈몬 커플링 효과를 나타내도록 근접하게 위치시키는 단계;상기 세포의 제1 시점과 제2 시점에서의 프로브의 산란 이미지와 상기 플라즈몬 금속 나노입자간의 플라즈몬 커플링 효과에 따른 파장에 따른 스펙트럼을 얻는 단계; 상기 스펙트럼을 분석하여 상기 제1 시점과 상기 제2 시점에서의 단백질들의 분포 정보를 획득하는 단계; 및 상기 제1 시점과 상기 제2 시점 사이의 상기 세포핵 내 검출 대상 단백질의 공간 내 분포 변화를 판단하는 단계;를 포함하고,상기 단백질은 노화 과정 중에서 재분포되는 이질염색질의 마커로서의 수식화된 히스톤인 것을 특징으로 하는, 세포핵 내 단백질 분포 변화 검출 방법.

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제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 플라즈몬 금속 나노입자는 금 나노입자, 은 나노입자 및 이들의 조합으로부터 선택되는, 방법.

4

제1항에 있어서, 상기 스펙트럼은 산란 스펙트럼을 포함하는, 방법.

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제1항에 있어서, 상기 분석은 플라즈몬 커플링 효과에 따른 스펙트럼 변화 분석하는 것을 포함하는, 방법.

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제1항에 있어서, 상기 방법은 단백질들의 분포가 다른 세포를 대상으로 측정 또는 시뮬레이션에 의해 얻어진 스펙트럼을 미리 준비하는 단계를 더 포함하는, 방법.

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제1항에 있어서, 상기 방법은, 상기 분포 정보를 통해서 상기 세포의 세포 노화 단계를 판단하는 단계를 더 포함하는, 방법.

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제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 히스톤은 H3K9me3, H3K27me3, H3K56me3, H3K64me3 및 H4K20me3로부터 선택되는, 방법.

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