TEMPO로 산화시킨 덱스트린이 코팅된 산화철 나노입자 및 이를 이용한 식중독균 검출 방법
Iron oxide nanoparticles coated with dextrin oxidized with TEMPO and method for detecting food poisoning bacteria using thereof
특허 요약
본 발명은 TEMPO(2,2,6,6-tetramethylpiperidine-N-oxyl)로 산화시킨 덱스트린이 코팅된 산화철 나노입자 및 히알루론산 및 자기영동법을 사용하여 표적 식중독균을 정확하고, 효율적으로 검출하는 방법에 관한 것으로, 상기 산화철 나노입자가 기존에 표적 균주 검출에 사용되는 산화철 나노입자보다 표적 식중독을 더 효과적으로 검출할 수 있음을 확인함으로써, 식중독균 검출 방법으로서 유용하게 활용될 수 있다.
청구항
번호청구항
1

TEMPO(2,2,6,6-tetramethylpiperidine-N-oxyl)로 산화시킨 덱스트린(dextrin)이 코팅된 산화철 나노입자로서,상기 나노입자는 과산화효소(peroxidase) 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 나노입자.

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2가 또는 3가 철 이온 및 덱스트린(dextrin)을 녹인 수용액에 암모니아수를 처리하면서 초음파 처리하여 덱스트린이 코팅된 산화철 나노입자를 제조하는 단계(제1단계); 및 상기 제1단계의 산화철 나노입자를 TEMPO(2,2,6,6-tetramethylpiperidine-N-oxyl) 및 차아염소산나트륨과 혼합하고, 초음파 처리하는 단계(제2단계)를 포함하는, 청구항 1의 TEMPO로 산화시킨 덱스트린이 코팅된 산화철 나노입자 제조방법.

4

청구항 1의 TEMPO로 산화시킨 덱스트린이 코팅된 산화철 나노입자에 대장균(Escherichia coli)에 특이적으로 결합하는 항체를 결합시키는 단계(제1단계);대상체로부터 대장균을 획득하는 단계(제2단계);상기 제1단계의 항체가 결합된 산화철 나노입자를 히알루론산과 혼합하고, 혼합한 용액에 상기 제2단계에서 획득한 대장균을 반응시켜 산화철 나노입자 및 대장균으로 구성된 복합체를 형성시키는 단계(제3단계);자기영동법을 통해 상기 제3단계의 복합체를 분리하는 단계(제4단계); 및상기 제4단계의 복합체에 과산화수소 및 TMB(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)를 혼합하고, 발색을 유도한 후, 흡광도를 측정하여 비색 반응을 확인하는 단계(제5단계)를 포함하는, 대장균 검출 방법.

5

청구항 4에 있어서, 상기 대장균은 대장균 O157:H7(Escherichia coli O157:H7)인 것을 특징으로 하는, 대장균 검출 방법.

6

청구항 4에 있어서, 상기 제5단계는 비색 반응을 정량 분석하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 대장균 검출 방법.

7

청구항 4의 대장균균 검출 방법을 통해 대장균을 검출하는 단계(제1단계); 및대조군과 비교해서, 검출되는 대장균이 많은 경우, 상기 대장균에 의한 질환이 발생했거나, 발생할 가능성이 높다고 판단하는 단계(제2단계)를 포함하는, 대장균에 의한 질환 진단을 위한 정보를 제공하는 방법.

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청구항 7에 있어서, 상기 대장균에 의한 질환은 피부감염, 식중독, 중이염, 방광염, 복막염, 요로감염, 유방염, 폐렴, 심내막염, 결막염, 관절염, 자궁내막염, 선역, 패혈증 및 여드름으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 대장균에 의한 질환 진단을 위한 정보를 제공하는 방법.