슈도알테로모나스 니그리파시엔스 유래 할로게나제를 이용한 인돌 또는 인디고 유도체 생합성 방법
Method for biosynthesis of indole or indigo derivative using halogenase derived from Pseudoalteromonas nigrifaciens
특허 요약
본 발명의 인돌 유도체 생합성 방법은 트립토판을 할로겐 이온 공여체의 존재 하에서 슈도알테로모나스 니그리파시엔스 유래 할로게나제 및 트립토파나제로 효소 반응시키는 단계를 포함하며, 본 발명의 인돌 유도체 생산용 재조합 세포는 슈도알테로모나스 니그리파시엔스 유래 할로게나제 및 트립토파나제를 발현하며, 본 발명의 인디고 유도체 생합성 방법은 트립토판을 할로겐 이온 공여체의 존재 하에서 슈도알테로모나스 니그리파시엔스 유래 할로게나제, 트립토파나제 및 플라빈 함유 모노옥시게나제로 효소 반응시키는 단계를 포함한다.
청구항
번호청구항
1

트립토판을 할로겐 이온 공여체의 존재 하에서 슈도알테로모나스 니그리파시엔스 유래 할로게나제 및 트립토파나제로 효소 반응시키는 단계를 포함하는 인돌 유도체 생합성 방법.

2

제1항에 있어서, 상기 할로게나제는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는, 인돌 유도체 생합성 방법.

3

제1항에 있어서, 상기 할로겐 이온 공여체는 할로겐 나트륨염인, 인돌 유도체 생합성 방법.

4

제1항에 있어서, 상기 인돌 유도체는 할로겐화-인돌인, 인돌 유도체 생합성 방법.

5

제1항에 있어서, 상기 할로겐은 염소 또는 브로민인, 인돌 유도체 생합성 방법.

6

제1항에 있어서, 상기 효소 반응시키는 단계는트립토판 및 할로겐 이온 공여체의 존재 하에서(a) 상기 할로게나제 및 트립토파나제를 발현하는 세포를 배양; 또는(b) 상기 할로게나제를 발현하는 세포 및 상기 트립토파나제를 발현하는 세포를 공동-배양;하는 단계인, 인돌 유도체 생합성 방법.

7

제6항에 있어서, 상기 (a)의 세포 및 상기 (b)의 할로게나제를 발현하는 세포는 플라빈 환원 효소를 더 발현하는, 인돌 유도체 생합성 방법.

8

제6항에 있어서, 상기 세포는 대장균 세포인, 인돌 유도체 생합성 방법.

9

슈도알테로모나스 니그리파시엔스 유래 할로게나제 및 트립토파나제를 발현하는 인돌 유도체 생산용 재조합 세포.

10

제9항에 있어서, 상기 할로게나제는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는, 인돌 유도체 생산용 재조합 세포.

11

제9항에 있어서, 상기 세포는 대장균 세포인, 인돌 유도체 생산용 재조합 세포.

12

제9항에 있어서, 플라빈 환원 효소를 더 발현하는, 인돌 유도체 생산용 재조합 세포.

13

트립토판을 할로겐 이온 공여체의 존재 하에서 슈도알테로모나스 니그리파시엔스 유래 할로게나제, 트립토파나제 및 플라빈 함유 모노옥시게나제로 효소 반응시키는 단계를 포함하는 인디고 유도체 생합성 방법.

14

제13항에 있어서, 상기 할로게나제는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는, 인디고 유도체 생합성 방법.

15

제13항에 있어서, 상기 할로겐 이온 공여체는 할로겐 나트륨염인, 인디고 유도체 생합성 방법.

16

제13항에 있어서, 상기 인디고 유도체는 할로겐화-인디고인, 인디고 유도체 생합성 방법.

17

제13항에 있어서, 상기 할로겐은 염소 또는 브로민인, 인디고 유도체 생합성 방법.

18

제13항에 있어서, 상기 효소 반응시키는 단계는트립토판 및 할로겐 이온 공여체의 존재 하에서(a) 상기 할로게나제, 트립토파나제 및 플라빈 함유 모노옥시게나제를 발현하는 세포를 배양;(b) 상기 할로게나제, 트립토파나제 및 플라빈 함유 모노옥시게나제 중에서 선택된 둘의 효소를 발현하는 세포 및 나머지 하나의 효소를 발현하는 세포를 공동-배양; 또는(c) 상기 할로게나제를 발현하는 세포, 상기 트립토파나제를 발현하는 세포 및 상기 플라빈 함유 모노옥시게나제를 발현하는 세포를 공동-배양;하는 단계인, 인디고 유도체 생합성 방법.

19

제18항에 있어서, 상기 (a)의 세포, 상기 (b)의 세포들 중 할로게나제를 발현하는 세포 및 상기 (c)의 세포들 중 할로게나제를 발현하는 세포는 플라빈 환원 효소를 더 발현하는, 인디고 유도체 생합성 방법.

20

제18항에 있어서, 상기 세포는 대장균 세포인, 인디고 유도체 생합성 방법.