돈육 부산물 유래 헤파린의 추출 방법
Method for extraction of heparin derived from by-product of pork
특허 요약
본 발명은 돈육 부산물 유래 헤파린의 추출 방법에 관한 것으로, 본 발명에 따른 방법으로 돈육 부산물로부터 헤파린을 추출할 경우 기존에 소장액으로부터의 추출에 국한되었던 헤파린 추출이 간, 폐, 심장, 위, 소장, 대장 등 다양한 부위에서도 가능함을 확인하였으며, 기존의 방법보다 추출 소요 시간을 1/4 이상 감소시키고, 저렴한 효소를 사용하여 유사한 양의 헤파린을 추출함으로써 경제적이면서도 효율적으로 헤파린을 추출할 수 있어 현재 판매되는 의료용 헤파린의 원가를 절감할 수 있는 효과를 가진다. 또한, 본 발명에 따른 헤파린 추출 방법은 탈지 및 탈수 과정에서 시약의 처리를 통해 내장 부산물의 부피를 줄이고 수분을 제거하여 보관 및 취급을 용이하게 하고, 사용 가능한 유통 기한을 증가시킬 수 있으며, 헤파린 추출 과정에서 조지방 및 단백질 등이 함께 추출됨으로써 헤파린 뿐만 아니라 다른 고부가가치 물질을 생산하여 더 많은 경제적 이익을 창출해 낼 수 있을 것으로 기대된다.
청구항
번호청구항
1

(a) 돈육 부산물을 세척하여 자가분해 시키는 단계;(b) 자가분해된 돈육 부산물을 탈지 처리하여 조지방을 제거하고 탈수 처리하여 돈육 부산물 분말을 획득하는 단계;(c) 돈육 부산물 분말에 포화 황산암모늄(ammonium sulfate) 및 수산화나트륨(NaOH) 용액을 첨가하여 추출하는 단계;(d) 추출한 용액에 황산을 넣어 황산암모늄 침전물을 제거하는 단계;(e) 황산암모늄 침전물을 제거한 용액에 알코올을 넣어 침전되는 침전물을 수득하는 단계;(f) 바실러스 메틸로트로피쿠스(bacillus methylotrophicus)를 접종하여 발효시킨 대두박에서 추출한 효소를 이용하여 상기 (e) 단계에서 수득한 침전물의 단백질을 분해하고 제거하는 단계; 및(g) 상기 단백질이 제거된 용액에 알코올을 첨가하여 침전되는 침전물을 세척하고 건조하여 헤파린을 수득하는 단계를 포함하는, 돈육 부산물 유래 헤파린의 추출 방법.

2

제1항에 있어서,상기 돈육 부산물은 돼지의 간, 폐, 심장, 위, 소장, 및 대장으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 방법.

3

제1항에 있어서,상기 (a) 단계에서 자가분해는 20℃ 내지 30℃에서 20 내지 30시간 동안 수행하는 것을 특징으로 하는, 방법.

4

제1항에 있어서,상기 (b) 단계에서 탈지는 클로로포름(chloroform)과 메탄올(methanol)을 2:1(v/v)로 혼합한 용액을 이용하여 수행하는 것을 특징으로 하는, 방법.

5

제1항에 있어서,상기 (c) 단계에서 추출은 50℃ 내지 70℃에서 수행하는 것을 특징으로 하는, 방법.

6

제1항에 있어서,상기 (f) 단계에서 효소는 0.01%(w/w) 내지 0.05%(w/w) 첨가하여 pH 9 내지 11 조건에서 12 내지 16시간 동안 50℃ 내지 60℃에서 반응시키는 것을 특징으로 하는, 방법.