줄기세포 또는 종양세포 기반 다종세포 조직 구조 모사체 및 이의 제조 방법
Methods to develop the reconstituted miniature tissues with multiple cell types from patient-derived stem or tumor cells
특허 요약
본 발명은 정상 세포 및 종양 세포를 in vitro에서 배양하여 신약개발 및 질병모델 플랫폼으로 사용하는 종양 오가노이드 기술을 발전시킨 조직 구조 모사체 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 방광 조직 및 방광 종양 세포를 in vitro에서 배양하고, 3차원 바이오 프린팅을 기반으로 기질세포, 혈관세포, 면역세포, 근육세포 등 미세환경 구성 세포의 재구성을 통해 제조된 줄기세포 또는 종양세포 기반 다종세포 조직 구조 모사체 및 이의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명을 통해 고안된 줄기세포 또는 종양세포 기반 다종세포 조직 구조 모사체는 조직 미세환경의 주 요소인 기질세포, 혈관세포, 면역세포, 근육세포 등을 조직 재구성을 통해 기존 오가노이드에 구현함으로써 체내 조직의 생리학적 및 병리학적 특징을 모사하는 것을 확인한 바, 정상 조직 및 종양 조직을 배양하여 신약개발 및 질병모델 플랫폼으로 이용할 수 있고, 보다 구체적으로는 방광 조직 및 방광 종양 조직을 in vitro에서 배양하여 신약개발 및 질병모델 플랫폼으로 유용하게 이용할 수 있을 것으로 기대된다.
청구항
번호청구항
1

다음 단계를 포함하는 조직 구조 모사체의 제조방법:(a) 오가노이드를 준비하는 단계;(b) 상기 오가노이드를 섬유아세포 및 내피세포를 포함하는 배지에서 배양하여 기질을 포함하는 오가노이드를 수득하는 단계;(c) 상기 (b)단계에 의해 배양된 오가노이드를 근육세포를 포함하는 배지에서 배양하여 근육층이 형성된 조직 구조 모사체를 수득하는 단계.

2

제 1항에 있어서, 상기 (a)단계의 오가노이드는 줄기세포 또는 종양 조직에서 어느 하나를 배양하여 제조하는 것을 특징으로 하는 조직 구조 모사체의 제조방법.

3

제 2항에 있어서, 상기 줄기세포는 요로상피 줄기세포인 것을 특징으로 하는 조직 구조 모사체의 제조방법.

4

제 2항에 있어서,상기 종양 조직은 경요도 방광 절제술(Transurethral Resection of Bladder tumors, TURB) 또는 방광 절제술 환자-유래 방광 종양 조직인 것을 특징으로 하는 조직 구조 모사체의 제조방법.

5

제 1항에 있어서,상기 섬유아세포는 마우스 배아 섬유아세포(mouse embryonic fibroblasts, MEF) 및 종양-연관 섬유아세포(cancer-associated fibroblasts, CAF)로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 조직 구조 모사체의 제조방법.

6

제 1항에 있어서, 상기 근육 세포는 1차 방광 평활근세포(primary bladder smooth muscle cells, BSMCs) 및 인간 평활근 세포(hSMCs)로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 조직 구조 모사체의 제조방법.

7

제 1항 내지 6항 중 어느 한 항에 의해 제조된 조직 구조 모사체.

8

제 7항에 있어서, 상기 조직은 방광 조직인 것을 특징으로 하는, 조직 구조 모사체.

9

제 7항에 있어서, 상기 조직은 방광 종양 조직인 것을 특징으로 하는, 조직 구조 모사체.