세포사멸 검출 세포 및 이를 이용한 세포사멸 검출 방법
The apoptosis sensing cell and the detection method ofapoptosis using the same
특허 요약
본 발명은 세포사멸 검출 세포 및 이를 이용한 세포사멸 검출 방법에 관한 것으로, 구체적으로 세포사멸시 활성화되는 캐스페이즈-3(caspase-3)에 의해 절단되어 형광신호가 핵 내로 이동하는 유전자 발현 카세트를 포함하는 바이러스 벡터가 형질전환된 세포사멸 검출 세포 및 이를 이용한 실시간 세포사멸 검출 방법에 관한 것이다. 본 발명의 세포사멸 검출 세포는 살아있는 세포를 대상으로 세포사멸을 실시간으로 검출할 수 있으며, 세포사멸을 유발 또는 저해하는 물질을 검색하는데 유용하게 사용될 수 있다. 세포사멸 측정, 캐스페이즈-3
청구항
번호청구항
1

NES(Neuclear export Signal), 캐스페이즈-3 절단자리(Caspase-3 cleavage site), 리포터 유전자, NLS(Neuclear localization signal)이 순차적으로 융합된 유전자 발현 카세트를 포함하는 세포사멸 검출용 바이러스 벡터.

2

제 1항에 있어서, 리포터 유전자는 GFP(green fluorescent protein) 및 여러 다른 색의 형광 단백질, 루시퍼레이즈(luciferase), 형광, 발광 또는 발색등으로 활성을 측정할수 있는 효소, FRET 형상을 이용한 형광 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포사멸 검출용 바이러스 벡터.

3

제 1항에 있어서, 바이러스 벡터는 레트로바이러스 벡터(retroviral vector), 렌티 바이러스 벡터(lentiviral vector), 아데노 바이러스 벡터(adeno viral vector), 아데노 관련 바이러스 벡터(adeno-associated viral vector), 헤르페스 바이러스 벡터(herpes viral vector), 알파 바이러스 벡터(alpha viral vector)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포사멸 검출용 바이러스 벡터.

4

제 1항에 있어서, 바이러스 벡터는 렌티 바이러스 벡터인 것을 특징으로 하는 세포사멸 검출용 바이러스 벡터.

5

제 1항의 세포사멸 검출용 바이러스 벡터를 숙주세포에 형질전환한 세포사멸 검출세포.

6

제 5항에 있어서, 숙주세포는 동물세포, 곤충세포 및 효모를 포함하는 진핵세포인 것을 특징으로 하는 세포사멸 검출세포.

7

제 5항에 있어서, 숙주세포는 신경교종(glioma) 세포인 것을 특징으로 하는 세포사멸 검출세포.

8

제 5항에 있어서, C6-caspase 3 sensing cell(수탁번호 KCLRF-BP-00136)인 것을 특징으로 하는 세포사멸 검출세포.

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  1. 제 1항의 세포사멸 검출용 바이러스 벡터를 피검 세포에 형질전환하는 단계; 및2) 단계 1)의 형질전환세포를 배양하여 형광신호를 모니터링하는 방법을 포함하는 세포사멸 측정 방법.
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  1. 제 5항의 세포사멸 검출용 세포에 피검 화합물을 처리하는 단계; 및2) 단계 1)의 세포사멸 검출용 세포를 배양하면서 형광 신호를 모니터링하는 단계를 포함하는 세포사멸 유발 및 저해 화합물 검색 방법.