CD8+ 백혈구 중 CD57+ 백혈구 비율 측정을 위한 미세유체 기반의 면역세포 포획기법
Microfluidic based immune cell capture technique for measurement of CD57+ leukocytes among CD8+ leukocytes
특허 요약
본 발명은 biotin-PEGylation 처리된 슬라이드 글래스 와 PDMS를 결합시켜 만든 미세유체 디바이스를 이용하여 수 십분 이내에 전혈, 또는 농축된 WBC 샘플 로부터 500개 이상의 CD8+ T세포를 선택적으로 포획하고 이중 CD57+ 의 비율 (즉, CD8+CD57+/CD8+ ratio)을 측정할 수 있도록 하는 방법이다.
청구항
번호청구항
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제17항에 있어서,상기 디바이스는 유체 저항 (fluidic resistance)를 조절하기 위한, 550 ㎛ 폭을 가지고, 5100 ㎜의 길이를 가지는 지그재그 형태의 유량 조절 (Flow rate control) 채널을 추가로 포함하는, 방법.

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제18항에 있어서,상기 CD8+ T 세포는 전혈 또는 백혈구 중에서 포획되는 것인, 방법.

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제19항에 있어서,상기 방법은 포획된 CD8+ T 세포 중 CD57+ T 세포의 비율을 추가적으로 측정할 수 있는 방법.

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biotin-PEGylation 처리된 슬라이드 글래스 (slide glass)를 포함하는 캡처 채널 (Capture channel)과 상기 채널 모양으로 본을 뜬 실리콘 고무 (silicone rubber)를 결합시켜 만든 미세유체 디바이스를 이용한, CD8+ T 세포를 선택적으로 포획하는 디바이스.

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제1항에 있어서,상기 디바이스는 유체 저항 (fluidic resistance)를 조절하기 위한, 550 ㎛ 폭을 가지고, 5100 ㎜의 길이를 가지는 지그재그 형태의 유량 조절 (Flow rate control) 채널을 추가로 포함하는, 디바이스.

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제2항에 있어서,상기 CD8+ T 세포는 전혈 또는 백혈구 중에서 포획되는 것인, 디바이스.

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제3항에 있어서,상기 유량 조절 채널은 15~100 ㎜의 유체 저항을 가지는 것인, 디바이스.

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제4항에 있어서,상기 채널들의 높이는 5~50 ㎛인, 디바이스.

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제5항에 있어서,상기 디바이스는 음압으로 상기 PDMS와 상기 슬라이드 글래스와의 결합을 유지하기 위하여 상기 채널 외각에 진공 라인 (vacuum line)을 추가로 구비하는 것인, 디바이스.

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제6항에 있어서,상기 캡처 채널을 구성하는 1개 이상의 라인은 5001000 ㎛ 폭 및 200010000 ㎛ 길이를 가지는 것인, 디바이스.

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제7항에 있어서,상기 캡처 채널을 구성하는 1개 이상의 라인은 75~200 ㎛ 두께의 벽으로 구분되는 것인, 디바이스.

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제8항에 있어서,상기 biotin-PEGylation 처리는 PEG와 비오틴 (Biotin)의 질량비율이 100:1 내지 100:50 로 이루어진 것인, 디바이스.

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제9항에 있어서,상기 디바이스는 포획된 CD8 T 세포 중 CD57+ T 세포의 비율을 추가적으로 측정하는 디바이스.

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제12항에 있어서,상기 포획된 CD8 T 세포 중 CD57+ T 세포의 비율을 측정하는 것은 임계값 처리 (threshold method) 방법을 통해 노이즈를 제거하는 것인, 디바이스.

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제11항에 있어서,상기 임계값 처리는 PE (Phycoerythrin) 염색 이미지의 경우 Yen 방법 (Yen method)를, BV (Brilliant Violet) 염색 이미지의 경우 Triangle method를 사용하는 것인, 디바이스.

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biotin-PEGylation 처리된 슬라이드 글래스 (slide glass)를 포함하는 캡처 채널 (Capture channel)과 상기 채널 모양으로 본을 뜬 실리콘 고무 (silicone rubber)을 결합시켜 만든 미세유체 디바이스를 이용한, CD8+ T 세포를 선택적으로 포획하는데 사용되는 키트.

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제13항에 있어서,상기 디바이스는 유체 저항 (fluidic resistance)를 조절하기 위한, 550 ㎛ 폭을 가지고, 5100 ㎜의 길이를 가지는 지그재그 형태의 유량 조절 (Flow rate control) 채널을 추가로 포함하는, 키트.

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제14항에 있어서,상기 CD8+ T 세포는 전혈 또는 백혈구 중에서 포획되는 것인, 키트.

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제15항에 있어서,상기 키트는 포획된 CD8+ T 세포 중 CD57+ T 세포의 비율을 추가적으로 측정할 수 있는 키트.

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biotin-PEGylation 처리된 슬라이드 글래스 (slide glass)를 포함하는 캡처 채널 (Capture channel)과 상기 채널 모양으로 본을 뜬 실리콘 고무 (silicone rubber)을 결합시켜 만든 미세유체 디바이스를 이용한, CD8+ T 세포를 선택적으로 포획하는 방법.