밀집 염색을 매개로 한 3차원 이미지 정합 및 이를 이용한 초고해상도 멀티 마커 동시 이미징 방법
METHOD FOR SUPER-RESOLUTION 3D MULTIPLEXED IMAGING WITH HIGH ACCURACY IMAGE REGISTRATION VIA DENSE LABELING OF SPECIMEN
특허 요약
다양한 실시예들은 밀집 염색을 매개로 한 3차원 이미지 정합 및 이를 이용한 초고해상도 멀티 마커 동시 이미징 방법에 관한 것으로, 밀집 염색을 통해, 생체 조직의 내부 구조에 적어도 하나의 기점 마커를 설정하고, 기점 마커가 설정된 생체 조직 내 적어도 하나의 표적 분자에 부착되는 형광 표지를 교체하면서 생체 조직을 반복적으로 이미징하여, 복수의 이미지들을 획득하고, 기점 마커를 기준으로 상기 이미지들을 정합하여, 표적 분자에 대한 최종 이미지를 획득하도록 구성된다.
청구항
번호청구항
15

제12 항 또는 제14 항의 멀티 마커 동시 이미징 방법을 수행하는 이미지 처리 장치.

1

3차원 이미지 정합 방법에 있어서,밀집 염색을 통해, 생체 조직의 내부 구조에 적어도 하나의 기점 마커를 설정하는 단계; 상기 기점 마커가 설정된 상기 생체 조직 내 적어도 하나의 표적 분자에 부착되는 형광 표지를 교체하면서 상기 생체 조직을 반복적으로 이미징하여, 복수의 이미지들을 획득하는 단계; 및상기 기점 마커를 기준으로 상기 이미지들을 정합하는 단계를 포함하고,상기 밀집 염색은 상기 내부 구조에 대해, NHS-에스터(ester) 분자를 이용하여 적용되는, 방법.

2

삭제

3

제1 항에 있어서,상기 이미지들을 획득하는 단계는,복수의 이미징 주기들에 따라 반복적으로 상기 생체 조직을 이미징하여, 상기 이미징 주기들의 각각에서 상기 이미지들의 각각을 획득하는,방법.

4

제3 항에 있어서, 상기 이미지들을 획득하는 단계는,상기 이미징 주기들 중 각각에서, 상기 표적 분자에 형광 표지를 부착하는 단계;상기 생체 조직을 이미징하여, 이미지를 획득하는 단계; 및상기 표적 분자에서 상기 부착된 형광 표지를 분리하는 단계를 포함하는, 방법.

5

제4 항에 있어서, 상기 이미징 주기들에서 상기 표적 분자에 각각 부착되는 형광 표지들은,동일하거나, 상이한,방법.

6

제3 항에 있어서,상기 생체 조직은,검출된 생체 시료로부터 팽창된 것인, 방법.

7

제6 항에 있어서,상기 생체 조직은,첫 번째 이미징 주기에서, 상기 표적 분자에 형광 분자가 부착된 후에, 팽창되는, 방법.

8

제6 항에 있어서,상기 이미지들을 획득하는 단계는,상기 생체 조직을 팽창시킨 후에, 상기 생체 조직 내 상기 표적 분자에 부착되는 상기 형광 표지를 교체하면서 상기 생체 조직을 반복적으로 이미징하여, 상기 이미지들을 획득하는,방법.

9

제6 항에 있어서,상기 생체 조직은, 상기 생체 시료에 하이드로젤을 적용하고, 상기 하이드로젤을 팽창시킴으로써, 생성되는, 방법.

10

제1 항에 있어서, 상기 이미지들을 정합하는 단계는,상기 기점 마커를 기준으로 상기 이미지들을 오버레이시켜, 상기 표적 분자에 대한 최종 이미지를 획득하는 단계를 포함하는,방법.

11

제1 항, 또는 제3 항 내지 제10 항 중 어느 한 항의 3차원 이미지 정합 방법을 수행하는 이미지 처리 장치.

12

멀티 마커 동시 이미징 방법에 있어서, 밀집 염색을 통해, 생체 조직의 내부 구조에 적어도 하나의 기점 마커를 설정하는 단계; 상기 기점 마커가 설정된 상기 생체 조직 내 적어도 하나의 표적 분자에 부착되는 형광 표지를 교체하면서 상기 생체 조직을 반복적으로 이미징하여, 복수의 이미지들을 획득하는 단계; 및상기 기점 마커를 기준으로 상기 이미지들을 정합하여, 상기 표적 분자에 대한 최종 이미지를 획득하는 단계를 포함하고,상기 밀집 염색은 상기 내부 구조에 대해, NHS-에스터 분자를 이용하여 적용되는,방법.

13

삭제

14

제12 항에 있어서, 상기 최종 이미지를 획득하는 단계는,상기 기점 마커를 기준으로 상기 이미지들을 오버레이시켜, 상기 최종 이미지를 획득하는 단계를 포함하는, 방법.