신규 인터페론 람다 변이체 및 이의 제조방법
Novel Interferon Lambda Variants and Preparation Method Thereof
특허 요약
본 발명은 구조 기반의 글리코엔지니어링(glycoengineering)을 통해 제조한 신규 인터페론 람다 변이체 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명의 신규한 인터페론 람다 변이체 및 이의 제조방법은 구조적 정보 기반의 글리코엔지니어링을 통해 통상의 정제 프로토콜을 통해서도, 포유류 세포주에서 현저히 향상된 생산 및 수율을 나타내며, 안정성, 반감기, 처리시 기능성 단백질의 분율 등 야생형 인터페론 람다에 비해 현저히 향상된 치료학적 특성을 나타낸다. 또한, 항 바이러스 활성 및 인터페론-자극 유전자 (interferon-stimulated gene, ISG)의 유도 수준에서, 야생형 인터페론 람다보다 현저히 뛰어나므로, 면역조절을 통한 암, 자가면역 질환 등과 같은 면역 관련 질환 및 코로나 바이러스를 포함한 다양한 바이러스 감염의 예방 및 치료에 유용하다.
청구항
번호청구항
6

제1항에 있어서, 상기 변이체는 야생형 인터페론 람다에 비해 in vivo에서 반감기가 증가한 것을 특징으로 하는 인터페론 람다 변이체.

5

제1항에 있어서, 상기 변이체는 야생형 인터페론 람다에 비해 전체 전하가 감소한 것을 특징으로 하는 인터페론 람다 변이체.

1

다음 중 어느 하나 이상의 조건을 만족하는 하나 이상의 부위에 변이를 포함하는 인터페론 람다 (Interferon lambda; IFNλ) 변이체:(i) 인터페론 람다 수용체 결합 영역 밖일 것;(ii) 변이된 아미노산 잔기가 인터페론 람다의 표면에 노출될 것; 및(iii) 한 점 돌연변이(single point mutation)에 의해 글리코실화가 가능한 공통 염기서열(Consensus sequence)이 달성될 것,여기서, 상기 글리코실화가 가능한 공통 염기서열은 N-X-(S 또는 T) 이고, 상기 X는 프롤린을 제외한 임의의 아미노산임.

2

제1항에 있어서, 상기 (i) 조건의 인터페론 람다 수용체는 IL10Rβ 또는 IFNλR1인 것을 특징으로 하는 인터페론 람다 변이체.

3

제1항에 있어서, 상기 변이로 인해 인터페론 람다의 어느 한 부위 이상이 글리코실화(glycosylation)되는 것을 특징으로 하는 인터페론 람다 변이체.

4

제3항에 있어서, 상기 글리코실화(glycosylation)는 N-글리코실화인 것을 특징으로 하는 인터페론 람다 변이체.

7

제1항에 있어서, 상기 변이체는 야생형 인터페론 람다에 비해 인터페론 람다 상호간의 소수성 상호작용이 감소한 것을 특징으로 하는 인터페론 람다 변이체.

8

제1항에 있어서, 상기 인터페론 람다는 인터페론 람다 4(IFNλ4)인 것을 특징으로 하는 인터페론 람다 변이체.

9

제8항에 있어서, 상기 부위는 상기 변이는 서열번호 20에서 L28, A54, P73, H97, K154 및 A173 중 어느 하나 이상의 위치에서의 아미노산이 아스파라긴으로 치환된 것을 특징으로 하는 인터페론 람다 변이체.

10

제8항에 있어서, 서열번호 20에서 L28 및 P73 중 어느 하나 이상이 아스파라긴으로 치환된 것을 특징으로 하는 인터페론 람다 변이체.

11

제1항의 인터페론 람다 변이체를 코딩하는 유전자.

12

제11항의 유전자를 포함하는 재조합 벡터.

13

제1항의 유전자 또는 제12항의 벡터가 도입된 재조합 숙주세포.

14

제1항 내지 제10항 중 어느 한 항의 인터페론 람다 변이체를 포함하는 면역조절용 조성물.

15

제1항 내지 제10항 중 어느 한 항의 인터페론 람다 변이체를 포함하는 바이러스 감염증의 예방 및 치료용 약학 조성물.

16

제1항 내지 제10항 중 어느 한 항의 인터페론 람다 변이체를 포함하는 암, 종양, 이식거부, 만성신부전, 간경변증, 당뇨 또는 고혈당증의 예방 및 치료용 약학 조성물.

17

제13항의 재조합 세포를 배양하여, 다음 중 어느 하나 이상의 조건을 만족하는 인터페론 람다의 하나 이상의 부위에 변이를 포함하는 인터페론 람다 변이체를 발현하는 단계; 및상기 발현된 인터페론 람다 변이체를 수득하는 단계를 포함하는 인터페론 람다 변이체의 생산방법:(i) 인터페론 람다 수용체 결합 영역 밖일 것;(ii) 변이된 아미노산 잔기가 인터페론 람다의 표면에 노출될 것; 및(iii) 상기 변이에 의해 글리코실화가 가능한 공통 염기서열(Consensus sequence)이 달성될 것,여기서, 상기 글리코실화가 가능한 공통 염기서열은 N-X-(S 또는 T) 이고, 상기 X는 프롤린을 제외한 임의의 아미노산임.