엑소좀을 분리하기 위한 다중 컬럼 및 엑소좀 분리 방법
MULTIPLE COLUMN CHROMATOGRAPHY AND METHOD FOR ISOLATING EXOSOMES
특허 요약
본 발명은 지질 단백질, 수용성 단백질 등의 불순물 및 엑소좀이 혼합된 생체시료로부터 엑소좀을 분리하기 위한 다중 컬럼 및 엑소좀 분리 방법에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
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엑소좀 분리용 다중 컬럼으로서,공극의 크기가 20nm 내지 100nm인 다공성 비드 a), 상기 다공성 비드 a) 상부에 적층되고, 공극의 크기가 20nm 이하인 다공성 비드 b) 및 상기 다공성 비드 a) 및 상기 다공성 비드 b) 사이에 위치하는 분리막을 포함하고,상기 다공성 비드 a)는 세파로스 CL-6B이고, 상기 다공성 비드 b)는 세파크릴 200-HR이며, 상기 다공성 비드 a)는 생체시료 내 엑소좀과 지질 단백질을 분리하는 것이고, 상기 다공성 비드 b)는 생체시료 내 엑소좀과 수용성 단백질을 분리하는 것인, 엑소좀 분리용 다중 컬럼.

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제1항에 있어서, 상기 다공성 비드 a) 및 상기 다공성 비드 b)의 부피비는 95:5 내지 5:95 인, 엑소좀 분리용 다중 컬럼.

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제2항에 있어서, 상기 다공성 비드 a) 및 상기 다공성 비드 b)의 부피비는 5:5 내지 1:9 인, 엑소좀 분리용 다중 컬럼.

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제3항에 있어서, 상기 다공성 비드 a) 및 상기 다공성 비드 b)의 부피비는 3:7 내지 1:9 인, 엑소좀 분리용 다중 컬럼.

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제1항에 있어서,상기 다공성 비드 a)의 표면 음전하는 상기 다공성 비드 b)의 표면 음전하 보다 높은 음전하 값을 가지는 것인, 엑소좀 분리용 다중 컬럼.

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삭제

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제1항에 있어서,상기 생체시료는 혈액, 림프액, 뇌척수액, 소변, 양수, 모유, 침, 정액 및 세포배양액으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인, 엑소좀 분리용 다중 컬럼.

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공극의 크기가 20nm 내지 100nm인 다공성 비드 a), 상기 다공성 비드 a) 상부에 적층되고, 공극의 크기가 20nm 이하인 다공성 비드 b) 및 상기 다공성 비드 a) 및 상기 다공성 비드 b) 사이에 위치하는 분리막을 포함하는, 다중 컬럼을 이용한 엑소좀 분리 방법으로서,엑소좀을 포함하는 생체시료를 상기 다공성 비드 b)에 통과시켜 엑소좀과 수용성 단백질을 분리하는 단계; 및상기 다공성 비드 b)를 통과한 생체시료를 상기 다공성 비드 a)에 통과시켜 엑소좀과 지질 단백질을 분리하는 단계; 를 포함하고,상기 다공성 비드 a)는 세파로스 CL-6B이고, 상기 다공성 비드 b)는 세파크릴 200-HR인, 엑소좀 분리 방법.

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제8항에 있어서,상기 다공성 비드 a) 및 상기 다공성 비드 b)의 부피비는 95:5 내지 5:95 인, 엑소좀 분리 방법.

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제9항에 있어서, 상기 다공성 비드 a) 및 상기 다공성 비드 b)의 부피비는 5:5 내지 1:9 인, 엑소좀 분리 방법.

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제10항에 있어서, 상기 다공성 비드 a) 및 상기 다공성 비드 b)의 부피비는 3:7 내지 1:9 인, 엑소좀 분리 방법.

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제8항에 있어서,상기 다공성 비드 a)의 표면 음전하는 상기 다공성 비드 b)의 표면 음전하 보다 높은 음전하 값을 가지는 것인, 엑소좀 분리 방법.

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삭제

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제8항에 있어서,상기 생체시료는 혈액, 림프액, 뇌척수액, 소변, 양수, 모유, 침, 정액 및 세포배양액으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인, 엑소좀 분리 방법.