보툴리늄 독소 검출용 센서 및 이의 이용한 보툴리늄 독소 검출 방법
Sensor for detecting botulinum neurotoxin and a detection method using the FRET
특허 요약
본 발명은 보툴리늄 독소 검출용 센서 및 이의 이용한 보툴리늄 독소 검출 방법에 관한 것으로, 에너지 전이의 도너(donor)가 되는 염료와 억셉터(acceptor)로 역할을 하는 산화 그래핀, 및 도너(donor)와 억셉터(acceptor)를 공유결합을 통해서 연결하는 결합 부분인 동시에 타겟 물질인 보툴리늄 독소와 기작하여 단백질 분해 반응을 일으키는 펩타이드 리간드 구조체를 포함하는 보툴리늄 독소 검출용 센서로써 신속하고 정확하게 보툴리늄 독소의 감지가 가능하므로 보툴리늄 독소를 검출하는데 유용하게 이용할 수 있다.
청구항
번호청구항
1

서열번호 1로 이루어진 아미노산을 갖는 펩타이드의 N 말단에는 산화 그래핀이 결합되고 상기 펩타이드의 C 말단에는 염료가 결합되고,상기 서열번호 1로 이루어진 펩타이드는나선형 구조를 가지며, 서열번호 2로 이루어진 아미노산을 갖는 스페이서(spacer)와; 서열번호 3으로 이루어진 아미노산을 갖는 펩타이드로 구성되는 것을 특징으로 하는 보툴리늄 독소 검출용 센서.

2

제 1항에 있어서, 상기 서열번호 1로 이루어진 아미노산을 갖는 펩타이드와 산화 그래핀은 공유 결합을 하는 것을 특징으로 하는 보툴리늄 독소 검출용 센서.

3

제 1항에 있어서, 상기 염료는 에너지를 전달하는 도너(donor) 부분인 것을 특징으로 하는 보툴리늄 독소 검출용 센서.

4

삭제

5

제 1항에 있어서, 상기 스페이서(spacer)는 산화 그래핀과 결합하는 것을 특징으로 하는 보툴리늄 독소 검출용 센서.

6

삭제

7

제 1항에 있어서, 상기 서열번호 3으로 이루어진 아미노산을 갖는 펩타이드는 보툴리늄 독소와 결합하는 것을 특징으로 하는 보툴리늄 독소 검출용 센서.

8

제 7항에 있어서, 상기 서열번호 3으로 이루어진 아미노산을 갖는 펩타이드의 15번째 알지닌(R)과 16번째 이소루신(I)는 보툴리늄 독소와 결합하여 가수분해 반응을 일으키는 것을 특징으로 하는 보툴리늄 독소 검출용 센서.

9
  1. 산화 그래핀을 합성하기 위한 그래파이트의 산화하는 단계:2) 산화 그래핀의 카르복실화하는 단계;3) 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드(1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl]carbodiimide hydrochloride, EDC) 결합 반응을 통해서 산화 그래핀에 형성된 카르복실 그룹을 서열번호 1로 이루어진 아미노산을 갖는 펩타이드 N 말단에 결합하는 단계; 및 4) 염료를 서열번호 1로 이루어진 아미노산을 갖는 펩타이드 C 말단에 결합하고 미 반응물을 제거하기 위하여 세척하는 단계를 포함하되,상기 서열번호 1로 이루어진 펩타이드는나선형 구조를 가지며, 서열번호 2로 이루어진 아미노산을 갖는 스페이서(spacer)와; 서열번호 3으로 이루어진 아미노산을 갖는 펩타이드로 구성되는 것을 특징으로 하는 보툴리늄 독소 검출용 센서의 제조방법.
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제 9항에 있어서, 상기 단계 3) 및 단계 4)의 결합은 공유 결합인 것을 특징으로 하는 보툴리늄 독소 검출용 센서의 제조방법.

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제 9항의 제조방법으로 제조한 보툴리늄 독소 검출용 센서를 보툴리늄 독소를 포함하는 시료와 반응시켜 형광 신호 변화 측정하는 단계를 포함하는 보툴리늄 독소를 검출하는 방법.