세포막결합성 리포좀에 의한 세포변형을 통하여 세포막성 소포에 약물을 포접하는 방법 및 이를 이용한 약물의 전달 방법
Method of drug loading in cell-derived membrane vesicles by engineering parent cells with membrane fusogenic liposomes and drug delivery method using thereof
특허 요약
본 발명은 세포막결합성 리포좀(membrane fusogenic liposome; MFL)을 이용하여 제조된 약물이 포접된 세포막성 소포, 이 세포막성 소포의 제조방법 및 이 세포막성 소포를 이용한 약물전달 방법에 관한 것으로, 구체적으로, 본 발명의 세포막성 소포는 친수성 약물과 소수성 약물을 동시에 포접할 수 있으며, 세포에서 분리된 세포막성 소포이므로 주변 세포에 좀더 효율적이고 선택적인 약물 전달을 가능하도록 할 뿐만 아니라, 생체에서 기원한 나노재료로 안전하고, 세포막성 소포에 직접 약물을 봉입시키는 단계가 불필요함으로써, 상기 세포막성 소포는 세포막성 소포가 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 다양한 암 및 퇴행성 질환의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
청구항
번호청구항
1
  1. 이중지질막으로 구성되며, 이중지질막에는 소수성 약물, 이중지질막 내부에는 친수성 약물을 포접하며 세포막에 융합하여 상기 소수성 약물 또는 친수성 약물을 포접하는 세포막성 소포를 분비시키는 리포좀(liposome)을 제조하는 단계;2) 단계 1)의 리포좀을 세포에 처리하여 세포로부터 세포막성 소포를 방출시키는 단계; 및3) 단계 2)에서 방출된 세포막성 소포를 수집하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 약물이 함유된 세포막성 소포의 제조방법.
2

제 1항에 있어서, 상기 이중지질막은 기본 지질(base lipid) 및 PEG(polyethylene glycol; 폴리에틸렌 글리콜)가 결합된 지질로 구성되는 것을 특징으로 하는 약물이 함유된 세포막성 소포의 제조방법.

3

제 2항에 있어서, 상기 기본 지질 및 PEG가 결합된 지질은 총 이중지질막 중량부에 대하여 각각 50 내지 80 중량부 및 1 내지 20 중량부인 것을 특징으로 하는 약물이 함유된 세포막성 소포의 제조방법.

4

제 2항에 있어서, 상기 이중지질막은 양전하가 부하된 지질(Positively charged lipid)을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 약물이 함유된 세포막성 소포의 제조방법.

5

제 4항에 있어서, 기본 지질:PEG가 결합된 지질:양전하가 부하된 지질은 60 내지 90 중량부:1 내지 10 중량부: 5 내지 30 중량부인 것을 특징으로 하는 약물이 함유된 세포막성 소포의 제조방법.

6

청구항 6은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제 5항에 있어서, 기본 지질:PEG가 결합된 지질:양전하가 부하된 지질은 70 내지 85 중량부:1 내지 5 중량부: 10 내지 25 중량부인 것을 특징으로 하는 약물이 함유된 세포막성 소포의 제조방법.

7

제 2항에 있어서, 상기 기본지질은 포스파티딜콜린(phosphatidicolin) 및 포스포에탄올아민(phosphoethanolamine) 계열의 인지질로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 인지질인 것을 특징으로 하는 세포막성 소포의 제조방법.

8

제 4항에 있어서, 상기 양전하가 부하된 지질은 18:1 TAP(1,2-dioleoyl-3-trimethylammonium-propane), 14:0 TAP(1,2-dimyristoyl-3-trimethylammonium-propane), 16:0 TAP(1,2-dipalmitoyl-3-trimethylammonium-propane), 18:0 TAP(1,2-stearoyl-3-trimethylammonium-propane), 18:0 DDAB(Dimethyldioctadecylammonium), 12:0 EPC(1,2-dilauroyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 14:0 EPC(1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 14:1 EPC(1,2-dimyristoleoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 16:0 EPC(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 18:0 EPC(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 18:1 EPC(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 16:0-18:1 EPC(1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), DOTMA(1,2-di-O-octadecenyl-3-trimethylammonium propane) 및 DOTAP(N-[1-(2,3-Dioleoyloxy)]-N,N,N-trimethylammonium propane methyl sulphate)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징을 하는 세포막성 소포의 제조방법.

9

제 1항에 있어서, 상기 리포좀은 표면전위가 12 내지 20 mV인 것을 특징으로 하는 약물이 함유된 세포막성 소포의 제조방법.

10

제 1항의 방법으로 제조된 소수성 약물 및 친수성 약물이 동시에 포접되어 있는 세포막성 소포.

11

제 2항의 방법으로 제조된 소수성 약물이 포접되어 있는 세포막성 소포.

12

제 2항의 방법으로 제조된 친수성 약물이 동시에 포접되어 있는 세포막성 소포.

13

총 이중지질막 중량부에 대하여 기본 지질:PEG가 결합된 지질:양전하가 부하된 지질이 70 내지 85 중량부:1 내지 5 중량부: 10 내지 25 중량부로 결합된 이중지질막으로 구성되며, 이중지질막에는 소수성 약물, 이중지질막 내부에는 친수성 약물을 포접하며 세포막에 융합하여 상기 소수성 약물 또는 친수성 약물을 포접하는 세포막성 소포를 분비시키는 것을 특징으로 하는 세포막결합성 리포좀.

14

제 13항에 있어서, 상기 리포좀은 표면전위가 12 내지 20 mV인 것을 특징으로 하는 세포막결합성 리포좀.

15

제 13항에 있어서, 상기 기본지질은 포스파티딜콜린(phosphatidicolin) 및 포스포에탄올아민(phosphoethanolamine) 계열의 인지질로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 인지질인 것을 특징으로 하는 세포막결합성 리포좀.

16

제 13항에 있어서, 상기 양전하가 부하된 지질은 18:1 TAP(1,2-dioleoyl-3-trimethylammonium-propane), 14:0 TAP(1,2-dimyristoyl-3-trimethylammonium-propane), 16:0 TAP(1,2-dipalmitoyl-3-trimethylammonium-propane), 18:0 TAP(1,2-stearoyl-3-trimethylammonium-propane), 18:0 DDAB(Dimethyldioctadecylammonium), 12:0 EPC(1,2-dilauroyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 14:0 EPC(1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 14:1 EPC(1,2-dimyristoleoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 16:0 EPC(1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 18:0 EPC(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 18:1 EPC(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), 16:0-18:1 EPC(1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-ethylphosphocholine), DOTMA(1,2-di-O-octadecenyl-3-trimethylammonium propane) 및 DOTAP(N-[1-(2,3-Dioleoyloxy)]-N,N,N-trimethylammonium propane methyl sulphate)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포막결합성 리포좀.

17

제 13항에 있어서, 상기 양전하가 부하된 지질은 DOTAP(N-[1-(2,3-Dioleoyloxy)]-N,N,N-trimethylammonium propane methyl sulphate; N-[1-(2,3-디올레오일옥시)]-N,N,N-트리메틸암모늄 프로판 메틸 설파이트)인 것을 특징을 하는 세포막결합성 리포좀.

18

제 13항에 있어서, 상기 약물은 세포막 염료, 광과민제, 항암제, 항생제인 것을 특징으로 하는 세포막결합성 리포좀.

19

청구항 19은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제 18항에 있어서, 상기 항암제는 칼세인(Calcein), 젬시타빈(gemcitabine), 부술판(Busulfan), 클로람부실(Chlorambucil), 시클로포스파미드(Cyclophosphamide), 멜파란(Melphalan), 시스플라틴(Cisplatin), 이포스파미드(Ifosfamide), 시타라빈(Cytarabine), 5-플루오로우라실(5-FU), 메토트렉세이트(Methotrexate; MTX), 다우노루비신(Daunorubicin), 아드리아마이신(Adriamycin), 빈블라스틴(Vinblastine), 빈크리스틴(Vincristine), 빈데신(Vindesine), 프로카바진(Procarbazine), 타목시펜(Tamoxifen), 메게스테롤 아세테이트(Megesterol acetate), 플루타미드(Flutamide) 및 고세렐린 아세테이트(Gosereline acetate, Zoladex)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 세포막결합성 리포좀.

20

청구항 20은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제 18항에 있어서, 상기 항생제는 페니실린(penicillin)계 항생제, 세팔로스포린(cephalosporine)계 항생제, 마크로라이드(macrolide)계 항생제, 테트라시클린(tetracycline)계 항생제, 퀘놀론(quinolone)계 항생제, 항히스타민제, 항균제, 클린다마이신(clindamycin), 메트로니다졸(metronidazole), 클로람페니콜(chloramphenicol), 악티노마이신-D(Actinomycin-D), 블레오마이신(Bleomycin) 및 미토마이신-C(Mitomycin-C)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 세포막결합성 리포좀.

21

제 13항의 리포좀 또는 제 10항의 세포막성 소포를 포함하는 약물전달용 조성물.

22

제 13항의 리포좀 또는 제 10항의 세포막성 소포를 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.

23

제 22항에 있어서, 상기 암은 폐암, 고환암, 방광암, 전립선암, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 췌장암, 피부암, 위암 및 간암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물.

24

제 13항의 리포좀 또는 제 10항의 세포막성 소포를 포함하는 항생제(antibiotics).

25

제 13항의 리포좀 또는 제 10항의 세포막성 소포를 포함하는 광민감제(photosensitiser).