스페로이드는 2차원(2D) 배양에 비해 생체 내(in vivo) 조건을 보다 더 잘 모사하는 생리학적 관련 환경을 제공함으로써 약물 스크리닝에서 강력한 도구로 부상해 왔다. 이러한 장점에도 불구하고, 스페로이드에서 수행되는 실험 결과는 종종 상당한 변동성과 편향의 영향을 받는다. 본 리뷰는 스페로이드에서 약물 효능을 평가하는 데 영향을 미치는 세 가지 핵심 요인을 탐구하며, 여기에는 제작 방법, 스페로이드 크기, 세포 생존율이 포함된다. 첫째, 흔히 사용되는 5가지 스페로이드 제작 플랫폼을 비교하고, 각 플랫폼의 원리, 장점 및 한계를 개괄한다. 둘째, 세포 증식, 세포자멸사, 단백질 발현, 세포 분화와 같은 스페로이드 크기 변동의 생물학적 기여 요인과 그것이 약물 반응에 미치는 영향을 검토한다. 셋째, 저산소 코어 형성 및 아노이키스(anoikis) 민감도와 같은 특징이 세포 생존율에 어떻게 영향을 주며, 잠재적으로 독성 평가를 어떻게 왜곡할 수 있는지를 논의한다. 본 리뷰는 스페로이드 기반 약물 스크리닝에서 편향을 최소화하고 재현성을 향상시키기 위한 개념적 틀을 제시한다.

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