1. 신규 Jagged1-Notch 신호와 뇌종양과의 상관관계를 마우스 모델과 환자유 래 뇌종양세포 모델을 이용하여 검증하고, 더 나아가 임상 데이터베이스를 활 용하여 타겟의 적합성을 확보할 계획임. 1) Jagged1 과발현 및 낙다운 세포주를 구축하여 뇌종양 줄기세포 변화를 in vitro 및 in vivo에서 분석 2) 임상 데이터베이스를 활용하여 Jagged1-Notch 신호가 뇌종양의 악성화에 미치는 영향 분석 3) 환자 조직을 활용하여 Jagged1-Notch 신호의 임상학적 의미성 분석 2. 기확보한 5종의 초기 유효물질을 기확립한 스크리닝 시스템 3종 + 추가적인 스크리닝 시스템 2종을 이용하여 분석하고, 동시에 뇌종양줄기세포의 특성 변 화를 확인하여 다음 단계인 Hit-to-Lead로의 경쟁력을 제고하고자 함. 1) CETSA (Cellular Thermal Shift Assay), DARTS (Drug Affinity Responsive Target Stability) 실험조건 최적화 및 초기 유효물질 분석 2) in vitro DMPK 평가를 약물 개발 초기에 도입하여 분석 3) in vitro DMPK 분석을 통한 약물성 비교 4) 확보된 약물에 의한 뇌종양 줄기세포의 특성 변화를 분석하여 후보 유효물질 을 선발하고자 함. 3. 마우스 모델을 이용하여 항암 POC (Proof-Of-Concept) 분석을 진행하고, 최소 2종의 후보 유효물질로부터 최소 10종 이상의 유도체를 확보하여 초기 최적화를 진행하고자 함. 1) in vivo BBB (Blood-Brain-Barrier) PK 평가 진행 2) Brain orthotopic 마우스 종양 모델을 이용한 항암 POC 분석 3) Subcutaneous 마우스 종양 모델을 이용한 항암 POC 분석 4) 2종 이상의 후보 유효물질로부터 최소 10종 이상의 유도체 확보 5) 확보한 유도체의 효능을 기확립한 스크리닝 시스템을 이용하여 분석 6) 선별된 유도체들의 in vitro DMPK 평가 진행 7) 최종 선별된 유도체들의 마우스 모델에서의 항암 POC 분석