본 연구에서는 최근 개발한 등온 기술인 nicking and extension chain reaction system 기반 증폭(NESBA) 반응에 clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated protein 13a(Cas13a)를 통합함으로써, 유전체 핵산을 검출하기 위한 초고감도이면서 신속한 전략을 개발하였다. CESBA라 명명된 이 기법에서는 NESBA 반응이 초기 표적 유전체 RNA(gRNA)로부터 다량의 RNA 증폭산물(amplicon)을 등온 조건에서 생성한다. 생성된 RNA 증폭산물은 crRNA(crispr RNA)에 결합하여 Cas13a의 부수적 절단(collateral cleavage) 활성을 활성화시키며, 그 결과 인접한 리포터 프로브를 절단하여 최종 신호를 생성한다. 이러한 설계 원리에 근거하여, 우리는 SARS-CoV-2 gRNA를 모델 표적으로 형광 및 측면흐름분석(LFA) 기반 모드 모두에서, 다른 사람 코로나바이러스(H-CoVs)에 대해 우수한 특이성을 보이면서도 단 1 copy(0.05 copies/μL) 수준까지 매우 민감하게 검출하는 데 성공하였다. 또한, 임상 적용 가능성을 20개의 임상 검체에 적용하여 100%의 임상적 민감도 및 특이도로 검증하였다. 본 연구는 분자진단에서 유전체 핵산을 동정하기 위한 강력하고 혁신적인 전략을 제시하며, 탁월한 수준의 감도를 제공한다.

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