□ 1 차 년도 - 아편계 진통제의 지속적인 정맥 투여에 대한 동물모델 확립 ㆍ 사람이 아편계 진통제(Morphine, Oxycodone, Hydrocodone, Fentanyl)를 반복적으로 투여받는 형태와 가장 흡사한 동물모델을 확립함. ㆍ 실험동물의 정맥 내 영구적인 카테터(Poly urethane tubing)를 삽입하는 수술을 시행한 다음, 삽입된 카테터를 통해 아편계 진통제를 투여받도록 함. - 지속적인 투여에 따른 약물의 내성 발생 및 심화를 확인 ㆍ 아편계 진통제를 지속적으로 투여하면서 기계적 통증 또는 열 자극 통증에 대한 반응을 측정함으로써 약물에 대한 내성이 발생되는지, 투여 기간이 경과하면서 내성이 심화되는지를 측정함. □ 2 차 년도 - 아편계 진통제의 내성을 침 치료가 억제하는지 확인 ㆍ 1 차 년도에서 확립된 아편계 진통제의 내성에 대한 동물모델에 침 치료를 시행하고 내성의 발생 또는 심화를 침 치료가 억제하는지를 평가함. ㆍ 관련된 한의학 문헌 자료 및 선행 연구들을 연구 시작 전 사전 조사하여 경혈 후보군을 확보하고, 선별된 후보군에 침 치료를 시행하여 가장 효과적인 경혈을 선택함. □ 3 차 년도 - VTA-NAc의 GABA-DA pathway에서 침 치료 효능의 연관성 규명 ㆍ 아편계 진통제의 반복적인 투여에 따라 내성이 발생할 때 Ventral tegmental area(VTA) → Nucleus accumbens(NAc)로 연결되는 Neuronal pathway에서 Gamma aminobutyric acid(GABA) interneuron의 항진 또는 약화가 관여되어 있는지를 확인함. ㆍ 아편계 진통제의 내성을 억제하는 침 치료의 효능이 GABAergic interneuron의 비정상적인 항진 또는 약화의 정상화를 통해 발휘되는지를 규명함. ㆍ 아편계 진통제의 반복적인 투여에 따라 내성이 발생할 때 Ventral tegmental area(VTA) → Nucleus accumbens(NAc)로 연결되는 Neuronal pathway에서 Dopamin(DA) neuron의 항진 또는 약화가 관여되어 있는지를 확인함. ㆍ 아편계 진통제의 내성을 억제하는 침 치료의 효능이 DAergic neuron의 비정상적인 항진 또는 약화의 정상화를 통해 발휘되는지를 규명함. □ 4 차 년도 - NAc-VTA의 Glutamete pathway에서 침 치료 효능의 연관성 규명 ㆍ 아편계 진통제의 내성에서 NAc → VTA로 연결되어 VTA DA neuron을 control 하는 Glutamate neuron의 항진 또는 약화가 관여되어 있는지를 확인하고, 침 치료의 효능이 Glutamate neuron의 비정상적인 항진 또는 약화를 정상화시키는지를 규명함. - PFC, Amyg, Hipp에서 침 치료 효능의 연관성 규명 ㆍ 아편계 진통제의 내성에서 Prefrontal cortex(PFC), Amygdala(Amyg), Hippocampus(Hipp) → NAc로 연결되는 Glutamate neuron의 항진 또는 약화가 관여되어 있는지를 확인하고, 침 치료의 효능이 이러한 Glutamate neuron의 비정상적인 항진 또는 약화를 정상화시키는지를 규명함. □ 5 차 년도 - RMTg의 GABA neuron과 침 치료 효능의 연관성 규명 ㆍ 아편계 진통제의 의존성에서 가장 중요한 역할을 하는 VTA-NAc DA neuron에 대해 VTA에서 영향을 미치는 Rostromedial tegmental area(RMTg) GABA neuron의 항진 또는 약화가 내성에 관련되어 있는지를 확인하고, 침 치료의 효능이 이 신경로의 비정상적인 항진 또는 약화를 정상화시키는지를 규명함. - LHb의 Glutamate neuron과 침 치료 효능의 연관성 규명 ㆍ RMTg의 상위 단계에서 RMTg에 영향을 미치는 Lateral habenula(LHb) → RMTg로 연결되는 Glutamate neuron의 항진 또는 약화가 내성에 관련되어 있는지를 확인하고, 침 치료의 효능이 이 신경로의 비정상적인 항진 또는 약화를 정상화시키는지를 규명함.