1) 1차년도 (2020) 가시아메바에 내공생세균이 감염된 후 초기 (12시간) 및 후기 (24시간) 상태에서의 RNA를 단독 가시아메바의 RNA와 비교 분석하여 내공생세균에 의해 발현이 감소하는 유전자 및 증가하는 유전자들을 전체적으로 분석한다. 또한 일반 박테리아를 탐식한 가시아메바의 RNA와도 비교 분석하여 소화에 실제적으로 관여하는 유전자들의 발현 변화를 분석한다. 2) 2차년도 (2021) 1차년도 연구에서 급격한 발현변화를 보인 유전자들에 대해 Real Time PCR을 수행하여 그 결과를 검증한 후, 해당 유전자에 대한 siRNA를 아메바에 처리하여 일반 박테리아에 대한 소화도 저해되는지 확인한다. 이 결과로 탐식포 형성 및 소화에 직접적으로 관여하는 유전자들을 선별하여 그 목록을 작성한다. 3) 3차년도 (2022) 가시아메바에 감염된 후 발현이 증가하는 Legionella의 유전자 중 분비되는 단백질들을 선별하여 그 유전자를 확보한다. pUb vector에 cloning 한 후 가시아메바에 transfection 시켜 세포내 그 위치를 확인한다. 핵 또는 세포질에서 소화를 억제시키는 데 참여하는 단백질들의 작용 기전을 규명한다.

본 과제는 콘택트렌즈 소독·보관용 다목적 용액의 살균 효과를 가시아메바 기준으로 조사하고, 각 용액의 안전성과 상용 가능성을 검토하는 연구임. 연구 목표는 시판 콘택트렌즈 소독제·다목적 용액의 가시아메바 영양형·포낭형 살충효과를 확인하고, 살충능이 없는 국내 용액에 자가포식 억제제 및 셀룰로즈 합성 억제제를 첨가해 낮은 농도의 PHMB에서도 살충효과가 나타나는지 검증하는 데 있음. 핵심 내용은 1~3차년의 살충효과 검사, 인체각막상피세포 세포독성, 보관 가능 기간 확보임. 기대효과는 가시아메바 각막염 예방, 국내 제품 수요·수출 확대, 포낭형 원충 대응 약물 개발 근거 제공임.

본 과제는 가시아메바와 같이 포낭을 형성해 약제에 잘 견디는 병원성 원충의 감염 문제를 해결하기 위한 기초 연구임. 연구 목표는 포낭 형성에 중요한 자가포식을 억제해 기존 치료제의 효과를 높이는 방향을 찾는 것임. 핵심 연구 내용은 형광표지된 Atg8·Atg16 단백질을 이용한 stable transfection system 구축, siRNA를 통한 자가포식체 형성 저해, 자가포식체 억제물질 탐색, 억제물질과 치료제의 혼합 처리에 따른 살충효과 변화 검증으로 구성됨. 기대 효과는 포낭형성 원충의 자가포식 및 세포분화 기작 이해 증진과 더 효과적인 살충제·항생제·임상 약물 개발 기반 마련임

본 과제는 환경 변화에 따라 영양형에서 포낭형으로 전환하는 가시아메바의 특징을 이해하고 이 과정에 관여하는 신호전달체계를 밝히기 위한 연구임. 연구 목표는 포낭형성에 중요한 Protein Kinase C 신호전달체계를 규명하여 병원성 원충의 전파 차단 기반을 마련하는 데 있음. 핵심 연구 내용은 포낭형 cDNA library 분석을 통해 PKC isoform을 확보하고 발현 변화를 확인하며, recombinant protein과 항체를 제작해 단백질 증가 여부를 검증함. 이어 EGFP vector와 siRNA를 활용해 단백질 위치와 기능을 규명하고 포낭형성 억제 여부를 분석함. 기대 효과는 원충의 세포분화 기작 이해도 향상과 아메바 질환 대응 및 신약 개발 기반 제공임.