유자(Citrus junos)는 한국, 일본, 중국을 포함한 아시아 국가에 자생하는 감귤류 식물이다. 유자 과피와 종자에는 비타민 C, 구연산, 폴리페놀 등이 풍부하게 함유되어 있다. 다른 감귤류 및 유자 추출물의 항산화 및 항멜라닌 생성 활성은 보고되어 왔으나, 유자 종자 추출물에 포함된 리모노이드 아글리콘의 티로시나제 억제 활성은 알려져 있지 않다. 우리는 유자 종자를 껍질(husk), 종피(shell), 분말(meal)로 분리하고 각 부분의 항산화 활성을 평가하였다. 껍질에서 동정된 리모노이드 글루코사이드 분획은 새로우며, 티로시나제 억제제인 노밀린(nomilin)을 포함하였다. 우리는 노밀린의 결합 부위를 규명하기 위해 티로시나제 억제 활성 및 비경쟁 억제(noncompetitive inhibition) 분석과 도킹 연구를 수행하였다. 또한 B16F10 흑색종 세포에서 노밀린의 항산화 기전 및 항멜라닌 생성 활성을 평가하였다. 독성을 나타내지 않는 노밀린의 농도는 <100 µg/mL였다. 노밀린은 농도 의존적으로 TYR, TRP-1, TRP-2 및 microphthalmia-associated transcription factor(MITF)의 단백질 발현을 억제하였다. 노밀린은 단백질 수준에서 p-CREB와 p-PKA의 수준을 유의하게 감소시켰고, mRNA 수준에서는 피부 미백 관련 인자인 MITF, 티로시나제(tyrosinase), TRP-1, TRP-2의 수준을 농도 의존적으로 감소시켰다. 따라서 유자 종자 껍질에서 유래한 노밀린은 화장품에서 피부 미백 제로 사용할 수 있다.

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