(1) 1차년도: 정상인의 조갑기질조직에서 분리한 세포 및 면역세포와의 공동배양하여 항암제처리로 인한 세포학적, 생화학적, 분자생물학적 변화 및 조갑기질세포와 면역세포간의 상호작용 분석 □ 정상인의 조갑기질조직에서 분리한 세포에 항암제처리로 인한 생물학적 변화 분석 ⦁ 조갑기질 조직의 구조적 분석: 면역조직화학법을 활용한 수 종의 케라틴 단백질 분석 ⦁ 다양한 항암제 처리로 조갑기질세포에서의 케라틴 단백질 발현 변화 분석 ⦁ 다양한 항암제 처리로 조갑기질세포에서 유도되는 세포사멸 및 염증반응에 관여하는 사이토카인 분석 □ 조갑기질세포를 면역세포와 공동배양하여 항암제처리로 인한 세포간의 상호작용 분석 ⦁ 항암제를 처리하여 배양한 면역세포의 배지를 조갑기질세포에 처리하여 조갑기질세포에서의 세포사멸 및 염증반응에 관여하는 사이토카인 분석 ⦁ 조갑기질세포와 면역세포를 공동배양하여 항암제처리로 인한 조갑기질세포에서의 세포사멸 및 염증반응에 관여하는 사이토카인 분석 (2) 2차년도: 항암제처리로 인한 조갑기질세포의 항상성 불균형 및 이로 인한 조갑손상 기전 분석 - 조갑기질세포의 사멸과 관련된 oligonucleosomal DNA fragmentation 패턴 분석, PI(propidium iodide) 염색 - 항암제처리로 인한 조갑기질세포의 inflammasome 분석: NLRP3, AIM2, NLRC4, Caspae-1, NALP1등의 발현 분석 - 세포사멸과 관련된 기전 중 Pyroptosis 연관성 분석 : IL-1 , IL-18등의 pro-inflammatory cytokines의 발현 및 활성 분석, Caspase-1, -11, -4, -5 및 gasdemin D등의 연관성 분석등 : z-YVAD-fmk 등을 비롯한Pyroptosis 저해제를 이용한 항생제 유도 조갑기질세포의 항상성 회복 확인 (3) 3차년도: 1, 2 차년도에서 발굴한 조갑손상기전 제어 타깃 후보물질 스크리닝 및 발굴 - 천연물 라이브러리 (천연물질연구소, 한화연)를 활용하여 조갑손상기전 제어 타깃 후보물질 발굴 - 동물실험으로 후보 물질의 타당성 검증