본 발명은 공여자의 혈액을 원심분리하여 말초 혈액 단핵 세포(Peripheral Blood Mononuclear Cells, PBMCs)를 분리하는 단계; 분리된 말초 혈액 단핵 세포를 NKCC-1에 현탁하고, NKCC-1에 혈청대체제를 추가하여 NKCC-c로 코팅된 플라스크에 세포를 씨딩하여 세포 농도가 초기의 2~3배가 되는 시점까지 1차 배양하는 단계;및1차 배양을 마친 세포를 세포 농도가 2.5~5.0x10 5 cells/ml이 되도록 NKCC-2에 현탁한 뒤 세포 배양용기에서 2차 배양하는 단계;를 포함하는 NK세포의 대량 증식 방법에 관한 것이며 증식 배양된 NK세포를 유효 활성 성분으로 포함하는 폐암 예방 및 치료용 조성물로 제공할 수 있다.