배아줄기세포 유래 중간엽 줄기세포 직접 분화용 배지, 그를 이용하여 중간엽 줄기세포를 제조하는 방법, 그에 의해 제조된 중간엽 줄기세포 및 그를 포함하는 세포 치료제에 관한 것으로, 일 양상에 따른 배지 조성물 및 방법에 의하면, 짧은 기간 내에 높은 수득률로 중간엽 줄기세포를 제조할 수 있을 뿐만 아니라, 배상체 형상의 단계가 없어 제조 공정이 단순하고, 균질성을 갖는 세포를 수득할 수 있어 기존 방법보다 단축된 기간으로 세포 치료제의 제공이 가능한 효과가 있다.