톨리포클라디움 니베움에서 사이클로스포린 대량 생산 방법
Method for mass culture of cyclosporine at Tolypocladium niveum
특허 요약
본 발명은 최적화된 배양방법에 따른 톨리포클라디움 니베움(Tolypocladium niveum)에서 사이클로스포린 A를 대량 생산하기 위한 방법에 관한 것으로, 구체적으로 포자 형성, 균사체 성장 및 사이클로스포린 생산 단계별 최적화된 배양액을 사용하고, 균사체 성장 배양 시 포자 접종량을 조절함으로써 사이클로스포린 A를 대량 생산하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법을 이용하여 면역억제제 및 항진균제로 사용되는 사이클로스포린 A를 대량생산할 수 있다. 사이클로스포린 A, 톨리포클라디움 니베움, 배양조건, 접종방법
청구항
번호청구항
1
  1. 톨리포클라디움 니베움(Tolypocladium niveum) 균주를 SSMA 포자 형성 배지(sterile semisynthetic medium agar)에서 8 내지 12일 동안 배양하여 포자를 형성하는 단계;
  2. 상기 포자를 여과함으로써 지역 균사체(areal mycelia)를 제거하는 단계;
  3. 단계 2)의 여과된 포자를 2.8 내지 3.2%(v/v)의 농도로 SSM 성장 배지(sterile semisynthetic medium)에 접종하여 3 내지 7일 동안 배양함으로써 상기 포자로부터 균사체를 발아하는 단계; 및,
  4. 상기 균사체를 L-발린이 포함되고 탄소원으로써 과당을 사용한 SM 배지(synthetic medium)에서 13 내지 17일 동안 배양하여 사이클로스포린 A를 생산하는 단계를 포함하는 사이클로스포린 A 대량생산 방법.
2

제 1항에 있어서, 단계 2)의 여과는 20 내지 30 ㎛ 여과기를 이용하는 것을 특징으로 하는 방법.

3

제 1항에 있어서, 단계 4)의 SM 생산 배지는 5 내지 7 g/ℓ의 L-발린 및 28 내지 32 g/ℓ의 과당을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.

4

SM 배지(synthetic medium)에 L-발린이 포함되고 탄소원으로써 과당을 사용한 사이클로스포린 A 생산 배지.

5

제 4항에 있어서, 상기 L-발린은 5 내지 7 g/ℓ을 포함하고 상기 과당은 28 내지 32 g/ℓ를 포함하는 것을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 생산 배지.