식물체에서 COVID-19 백신용 단백질을 발현하는 재조합 벡터 및 이를 이용한 백신 조성물의 제조방법
Recombinant vector expressing proteins for COVID-19 vaccine in plants and Methods of preparing vaccine composition using the same
특허 요약
본 발명은 식물체에서 COVID-19 백신용 단백질을 발현하는 재조합 벡터 및 이를 이용한 백신 조성물의 제조방법에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명은 NB(New Bip; new chaperone binding protein) 단백질, 스파이크 당단백질(spike glycoprotein)의 S1 서브유닛 단백질, T4 피브리틴의 Fd(foldon) 폴리펩티드 및 HDEL 펩타이드가 융합된 S1-Fd 재조합 항원 단백질; 및 NB 단백질, 스파이크 당단백질의 RBD 도메인, 인간 면역글로불린 Fc 단편 및 HDEL 펩타이드가 융합된 RBD-Fc 재조합 항원 단백질에 관한 것이다. 또한 본 발명은 식물세포에서 상기 재조합 항원 단백질의 발현을 위한 재조합 발현벡터, 상기 재조합 발현벡터로 형질전환된 형질전환체, 상기 형질전환체로부터 COVID-19 백신용 재조합 항원 단백질의 생산 방법 및 COVID-19 예방 또는 치료용 백신 조성물에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
11

제9항의 형질전환체를 배양하는 단계; 및상기 형질전환체 또는 이의 배양액으로부터 COVID-19 백신용 재조합 항원 단백질을 분리 및 정제하는 단계를 포함하는,식물체로부터 COVID-19 백신용 재조합 항원 단백질의 생산방법.

12

제11항의 방법으로 생산된 COVID-19 백신용 재조합 항원 단백질을 포함하는, COVID-19 예방 또는 치료용 백신 조성물.

13

제12항에 있어서,상기 백신 조성물에는 아주번트를 추가로 더 포함하는 것을 특징으로 하는, COVID-19 예방 또는 치료용 백신 조성물.

1

서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 NB(New Bip; new chaperone binding protein) 단백질; 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 스파이크 당단백질(spike glycoprotein)의 S1 서브유닛 단백질; 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 T4 피브리틴(fibritin)의 Fd(foldon) 폴리펩타이드; 및 서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어진 HDEL 펩타이드;가 융합된,COVID-19 백신용 S1-Fd 재조합 항원 단백질.

2

삭제

3

서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 NB(New Bip; new chaperone binding protein) 단백질을 코딩하는 NB 유전자; 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 스파이크 당단백질의 S1 서브유닛을 코딩하는 S1 유전자; 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 T4 피브리틴(fibritin)의 Fd(foldon)을 코딩하는 유전자; 및 서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어진 HDEL 펩타이드를 코딩하는 유전자;가 순차적으로 연결되어 포함된,식물세포에서 COVID-19 백신용 S1-Fd 재조합 항원 단백질의 발현을 위한 재조합 발현벡터.

4

제3항에 있어서,상기 NB 유전자는 서열번호 11의 염기서열로 이루어진 것이고;상기 스파이크 당단백질의 S1 서브유닛 유전자는 서열번호 7의 염기서열로 이루어진 것이고;상기 T4 피브리틴(fibritin)의 Fd(foldon)을 코딩하는 유전자는 서열번호 9의 염기서열로 이루어진 것이고;상기 HDEL 펩타이드를 코딩하는 유전자는 서열번호 12의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는, 식물세포에서 COVID-19 백신용 S1-Fd 재조합 항원 단백질의 발현을 위한 재조합 발현벡터.

5

제3항에 있어서,상기 S1-Fd 재조합 항원 단백질은 식물세포의 소포체로 표적화되어 발현되는 것을 특징으로 하는, 식물세포에서 COVID-19 백신용 S1-Fd 재조합 항원 단백질의 발현을 위한 재조합 발현벡터.

6

삭제

7

삭제

8

삭제

9

제3항의 재조합 발현벡터로 형질전환된 형질전환체.

10

제9항에 있어서,상기 형질전환체는 형질전환 식물체로서,애기장대, 대두, 담배, 가지, 고추, 감자, 토마토, 배추, 무, 양배추, 상추, 복숭아, 배, 딸기, 수박, 참외, 오이, 당근 및 샐러리로 이루어진 군 중에서 선택되는 하나 이상의 쌍자엽 식물; 또는 벼, 보리, 밀, 호밀, 옥수수, 사탕수수, 귀리 및 양파로 이루어진 군 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 형질전환체.

14

제12항에 있어서상기 재조합 항원 단백질은 세포성 면역반응 유도활성을 갖는 것을 특징으로 하는, COVID-19 예방 또는 치료용 백신 조성물.

15

제14항에 있어서,상기 세포성 면역반응 유도활성은 INF-γ 또는 TNF-a를 분비하는 CD4+ T세포 또는 CD8+ T세포의 활성 및 증식을 촉진시키는 것을 특징으로 하는, COVID-19 예방 또는 치료용 백신 조성물.