제11항에 있어서,상기 고정상(Stationary phase)에 시료를 첨가하기 전에 시료의 전처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제16항에 있어서,상기 시료의 전처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법.

제11항에 있어서,상기 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계 후 용출물의 후처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법.

(a) 고정상(Stationary phase)에 킬레이트 리간드를 고정시키는 단계;(b) 상기 킬레이트 리간드가 고정된 고정상에 금속을 첨가하여 킬레이트 리간드에 금속을 고정시키는 단계;(c) 상기 킬레이트 리간드에 고정되지 않은 금속 잔여물을 세척하는 단계;(d) 상기 세척한 고정상에 세포밖 소포체가 포함된 시료를 주입하여 킬레이트 리간드에 고정된 금속에 세포밖 소포체를 결합시키는 단계;(e) 상기 고정상에서 금속과 결합되지 않은 시료 잔여물을 세척하는 단계; 및(f) 상기 고정상에서 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계;를 포함하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제1항에 있어서,고정상(Stationary phase)은 아가로스 비드, 세파로스 비드, 마그네틱 비드, 금 나노입자, 산화철 나노입자, 나일론 멤브레인, 니트로셀룰로오스 멤브레인, PVDF 멤브레인, 종이, 플라스틱, 유리 및 금속 센서칩으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제1항에 있어서,상기 킬레이트 리간드는 이미노디아세트산(IDA, iminodiacetic acid), 니트릴로트리아세트산(NTA, nitrilotriacetic acid), 트리스(카복시메틸)에틸렌디아민(TED, tris-(carboxymethyl)ethylenediamine), 에틸렌디아민(ethylenediamine), 에틸렌디아민 테트라아세테이트(EDTA, ethylendiamine tetraacetate), 알킬렌디아민 트리아세트산(alkylenediamine triacetic acid), 디에틸렌트리아민펜타아세트산(DTPA, diethylenetriaminepentaacetic acid), 에틸렌글리콜 비스(베타-아미노에틸에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산(EGTA, ethylene glycol-bis(β-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid), 포스포세린(phosphoserine) 및 1,4,7-트리아조사이클로노난(TACN, 1,4,7-triazocyclononane)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제1항에 있어서,상기 금속은 스칸듐(Sc), 이트륨(Y), 티타늄(Ti), 지르코늄(Zr), 하프늄(Hf), 러더포듐(Rf), 바나듐(V), 니오븀(Nb), 탄탈룸(Ta), 더브늄(Db), 크롬(Cr), 몰리브덴(Mo), 텅스텐(W), 시보��(Sg), 망간(Mn), 테크네튬(Tc), 레늄(Re), 보륨(Bh), 철(Fe), 루테늄(Ru), 오스뮴(Os), 하슘(Hs), 코발트(Co), 로듐(Rh), 이리듐(Ir), 마이트너륨(Mt), 니켈(Ni), 팔라듐(Pd), 백금(Pt), 다름슈타튬(Ds), 구리(Cu), 은(Ag), 금(Au), 뢴트게늄(Rg), 아연(Zn), 카드뮴(Cd), 수은(Hg), 코페르니슘(Cn), 알루미늄(Al) 및 갈륨(Ga)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법.

제1항에 있어서,상기 시료는 포유동물 세포 배양 배지, 박테리아 세포 배양 배지, 효모 배양 배지, 조직 추출물, 암 조직, 혈청, 혈장, 침, 눈물, 땀, 소변, 대변, 뇌척수액(CSF, cerebrospinal fluid), 복수(ascite), 양수(amniotic fluid), 정액, 유(milk), 먼지, 담수, 해수, 토양 및 발효식품으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제1항에 있어서,상기 고정상(Stationary phase)에 시료를 첨가하기 전에 시료의 전처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제6항에 있어서,상기 시료의 전처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법.

제1항에 있어서,상기 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계 후 용출물의 후처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법.

제8항에 있어서,상기 용출물의 후처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법.

삭제

(a) 고정상(Stationary phase)에 킬레이트 리간드를 고정시키는 단계;(b) 세포밖 소포체가 포함된 시료에 금속을 혼합하여 세포밖 소포체와 금속을 결합시키는 단계;(c) 상기 킬레이트 리간드가 고정된 고정상에 상기 금속과 시료 혼합물을 첨가하여 킬레이트 리간드에 세포밖 소포체와 결합된 금속을 고정시키는 단계;(d) 상기 고정상에 결합되지 않은 잔여물을 세척하는 단계; 및(e) 상기 고정상에서 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계;를 포함하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제11항에 있어서,고정상(Stationary phase)은 아가로스 비드, 세파로스 비드, 마그네틱 비드, 금 나노입자, 산화철 나노입자, 나일론 멤브레인, 니트로셀룰로오스 멤브레인, PVDF 멤브레인, 종이, 플라스틱, 유리 및 금속 센서칩으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제11항에 있어서,상기 킬레이트 리간드는 이미노디아세트산(IDA, iminodiacetic acid), 니트릴로트리아세트산(NTA, nitrilotriacetic acid), 트리스(카복시메틸)에틸렌디아민(TED, tris-(carboxymethyl)ethylenediamine), 에틸렌디아민(ethylenediamine), 에틸렌디아민 테트라아세테이트(EDTA, ethylendiamine tetraacetate), 알킬렌디아민 트리아세트산(alkylenediamine triacetic acid), 디에틸렌트리아민펜타아세트산(DTPA, diethylenetriaminepentaacetic acid), 에틸렌글리콜 비스(베타-아미노에틸에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산(EGTA, ethylene glycol-bis(β-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid), 포스포세린(phosphoserine) 및 1,4,7-트리아조사이클로노난(TACN, 1,4,7-triazocyclononane)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제11항에 있어서,상기 금속은 스칸듐(Sc), 이트륨(Y), 티타늄(Ti), 지르코늄(Zr), 하프늄(Hf), 러더포듐(Rf), 바나듐(V), 니오븀(Nb), 탄탈룸(Ta), 더브늄(Db), 크롬(Cr), 몰리브덴(Mo), 텅스텐(W), 시보��(Sg), 망간(Mn), 테크네튬(Tc), 레늄(Re), 보륨(Bh), 철(Fe), 루테늄(Ru), 오스뮴(Os), 하슘(Hs), 코발트(Co), 로듐(Rh), 이리듐(Ir), 마이트너륨(Mt), 니켈(Ni), 팔라듐(Pd), 백금(Pt), 다름슈타튬(Ds), 구리(Cu), 은(Ag), 금(Au), 뢴트게늄(Rg), 아연(Zn), 카드뮴(Cd), 수은(Hg), 코페르니슘(Cn), 알루미늄(Al) 및 갈륨(Ga)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법.

제11항에 있어서,상기 시료는 포유동물 세포 배양 배지, 박테리아 세포 배양 배지, 효모 배양 배지, 조직 추출물, 암 조직, 혈청, 혈장, 침, 눈물, 땀, 소변, 대변, 뇌척수액(CSF, cerebrospinal fluid), 복수(ascite), 양수(amniotic fluid), 정액, 유(milk), 먼지, 담수, 해수, 토양 및 발효식품으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제18항에 있어서,상기 용출물의 후처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법.

삭제

(a) 고정상(Stationary phase)에 킬레이트 리간드를 고정시키는 단계;(b) 상기 킬레이트 리간드가 고정된 고정상에 세포밖 소포체가 포함된 시료와 금속을 첨가하는 단계;(c) 상기 킬레이트 리간드에 금속을 고정시키고, 상기 금속에 세포밖 소포체를 결합시키는 단계;(d) 상기 고정상에 결합되지 않은 잔여물을 세척하는 단계; 및(e) 상기 고정상에서 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계;를 포함하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제21항에 있어서,고정상(Stationary phase)은 아가로스 비드, 세파로스 비드, 마그네틱 비드, 금 나노입자, 산화철 나노입자, 나일론 멤브레인, 니트로셀룰로오스 멤브레인, PVDF 멤브레인, 종이, 플라스틱, 유리 및 금속 센서칩으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제21항에 있어서,상기 킬레이트 리간드는 이미노디아세트산(IDA, iminodiacetic acid), 니트릴로트리아세트산(NTA, nitrilotriacetic acid), 트리스(카복시메틸)에틸렌디아민(TED, tris-(carboxymethyl)ethylenediamine), 에틸렌디아민(ethylenediamine), 에틸렌디아민 테트라아세테이트(EDTA, ethylendiamine tetraacetate), 알킬렌디아민 트리아세트산(alkylenediamine triacetic acid), 디에틸렌트리아민펜타아세트산(DTPA, diethylenetriaminepentaacetic acid), 에틸렌글리콜 비스(베타-아미노에틸에테르)-N,N,N',N'-테트라아세트산(EGTA, ethylene glycol-bis(β-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid), 포스포세린(phosphoserine) 및 1,4,7-트리아조사이클로노난(TACN, 1,4,7-triazocyclononane)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제21항에 있어서,상기 금속은 스칸듐(Sc), 이트륨(Y), 티타늄(Ti), 지르코늄(Zr), 하프늄(Hf), 러더포듐(Rf), 바나듐(V), 니오븀(Nb), 탄탈룸(Ta), 더브늄(Db), 크롬(Cr), 몰리브덴(Mo), 텅스텐(W), 시보��(Sg), 망간(Mn), 테크네튬(Tc), 레늄(Re), 보륨(Bh), 철(Fe), 루테늄(Ru), 오스뮴(Os), 하슘(Hs), 코발트(Co), 로듐(Rh), 이리듐(Ir), 마이트너륨(Mt), 니켈(Ni), 팔라듐(Pd), 백금(Pt), 다름슈타튬(Ds), 구리(Cu), 은(Ag), 금(Au), 뢴트게늄(Rg), 아연(Zn), 카드뮴(Cd), 수은(Hg), 코페르니슘(Cn), 알루미늄(Al) 및 갈륨(Ga)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법.

제21항에 있어서,상기 시료는 포유동물 세포 배양 배지, 박테리아 세포 배양 배지, 효모 배양 배지, 조직 추출물, 암 조직, 혈청, 혈장, 침, 눈물, 땀, 소변, 대변, 뇌척수액(CSF, cerebrospinal fluid), 복수(ascite), 양수(amniotic fluid), 정액, 유(milk), 먼지, 담수, 해수, 토양 및 발효식품으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제21항에 있어서,상기 고정상(Stationary phase)에 시료를 첨가하기 전에 시료의 전처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체 분리 방법.

제26항에 있어서,상기 시료의 전처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법.

제21항에 있어서,상기 금속과 결합된 세포밖 소포체를 용출시키는 단계 후 용출물의 후처리 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 세포밖 소포체의 분리 방법.

제28항에 있어서,상기 용출물의 후처리 단계는 원심분리, 초원심분리, 여과, 한외여과, 음파처리, 밀도 구배 초원심분리, 크기 배제 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 폴리머 기반 침전 및 유기 용매 침전으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 방법을 이용하는 것인 세포밖 소포체 분리 방법.

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