소태아 혈청(FBS) 대체 조성물
Fetal Bovine Serum(FBS) Replacement Composition
특허 요약
본 발명은 소태아 혈청(fetal bovine serum; FBS)을 대체하는 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 세포 배양시 곤충 단백가수분해물을 포함함으로써 고가이면서 윤리적 문제가 있는 소태아 혈청의 사용량을 줄이면서도 인간을 포함한 동물 유래의 다양한 세포 배양시 소태아 혈청을 포함한 경우와 세포 생육에 미치는 영향이 동등하거나 그 이상의 세포 생장 촉진 효과가 확인됨에 따라, 상기 곤충 단백가수분해물을 포함하는 조성물은 소태아 혈청의 대체소재로 사용되며, 바이오분야에서의 세포 배양뿐만 아니라 배양육 및 이를 소재로 하는 다양한 식품 산업분야에 유용하게 활용될 수 있다.
청구항
번호청구항
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청구항 12에 있어서, 상기 제2단계는 80 내지 100 ℃에서 10 내지 30분 동안 중탕하여 자가 효소를 불활성화하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 유충 단백가수분해물의 제조방법.

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청구항 12에 있어서, 상기 제3단계는 80 내지 100 ℃에서 10 내지 30분 동안 가열하여 효소를 불활성화하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 유충 단백가수분해물의 제조방법.

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청구항 12에 있어서, 상기 가수분해효소는 알칼라아제(Alcalase), 플라보르자임(Flavourzyme), 뉴트라아제(Neutrase), 프로타맥스(Protamex), 사비나아제(Savinase), 피신(ficin), 브로멜라인(Bromelain) 및 파파인(Papain)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 갈색거저리 유충 단백가수분해물의 제조방법.

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갈색거저리 유충 단백가수분해물을 포함하는 세포 배양용 소태아 혈청 대체 조성물.

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청구항 1에 있어서, 상기 갈색거저리 유충 단백가수분해물은 갈색거저리 유충, 탈지한 갈색거저리 유충 또는 이의 분쇄물을 효소 가수분해시킨 가수분해 산물인 것을 특징으로 하는 소태아 혈청 대체 조성물.

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삭제

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청구항 2에 있어서, 상기 효소는 GRAS 등급 가수분해효소인 것을 특징으로 하는 소태아 혈청 대체 조성물.

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청구항 4에 있어서, 상기 GRAS 등급 가수분해효소는 알칼라아제(Alcalase), 플라보르자임(Flavourzyme), 뉴트라아제(Neutrase), 프로타맥스(Protamex), 사비나아제(Savinase), 피신(ficin), 브로멜라인(Bromelain) 및 파파인(Papain)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 소태아 혈청 대체 조성물.

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청구항 1에 있어서, 상기 세포는 혈액암세포, 폐암세포, 전립선암세포, 위암세포, 유방암세포, 췌장암세포 및 대장암세포로 이루어진 군에서 선택된 암세포; 조골세포; 신장세포; 섬유모세포; 연골세포; 간세포; 신경세포; 면역세포; 근육세포; 및 줄기세포로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 소태아 혈청 대체 조성물.

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청구항 1에 있어서, 상기 조성물은 세포의 계대배양이 가능한 것을 특징으로 하는 소태아 혈청 대체 조성물.

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청구항 1에 있어서, 상기 조성물은 소태아 혈청(fetal bovine serum; FBS) 또는 송아지 혈청(fetal calf serum; FCS)을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 소태아 혈청 대체 조성물.

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청구항 8에 있어서, 상기 조성물은 갈색거저리 유충 단백가수분해물 50 내지 90 중량% 및 소태아 혈청(FBS) 또는 송아지 혈청(fetal calf serum; FCS) 10 내지 50 중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 소태아 혈청 대체 조성물.

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청구항 1에 따른 소태아 혈청 대체 조성물을 포함하는 세포 배양용 배지 조성물.

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청구항 1에 따른 소태아 혈청 대체 조성물을 세포에 첨가하여 배양하는 단계를 포함하는 세포 배양방법.

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갈색거저리 유충을 분쇄하여 증류수에 기질 용액으로 제조하는 제1단계;상기 기질 용액을 중탕시켜 자가 효소를 불활성화하는 제2단계;상기 기질 용액에 가수분해효소를 첨가하여 가수분해한 후 가열하여 효소를 불활성화하는 제3단계;상기 가수분해한 가수분해물을 방랭한 후 원심분리하여 상등액을 얻는 제4단계; 및상기 상등액을 동결 건조하여 갈색거저리 유충 단백가수분해물을 수득하는 제5단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 유충 단백가수분해물의 제조방법.