샌드위치 효소면역측정법 기반 렙틴 바이오센서 및 이를 이용한 렙틴 검출방법
Sandwich ELISA-Based Electrochemical Biosensor for leptin and leptin detecting method using the same
특허 요약
본 발명은 샌드위치 효소면역측정법 기반 렙틴 바이오센서 및 이를 이용한 렙틴 검출방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 스크린 프린트 된 금 전극(SPGE)에 샌드위치 ELISA[DTSSP/leptin Ab(capture antibody)/leptin/biotinylated leptin Ab(detection antiboby)/streptavidin-HRP]를 기반으로 o-페닐렌디아민(oPD)의 산화반응을 이용하여 렙틴을 전기화학적으로 검출하는 기술에 관한 것이다. 본 발명에 따른 샌드위치 효소면역측정법 기반 렙틴 바이오센서를 이용하면, 렙틴 농도 검출곡선은 0.1 ~ 20 ng/mL 범위에서 확인되었고, 상용 ELISA 측정과 비교하여 높은 안정성, 민감도, 선택성 및 효과성을 나타내었기 때문에, 상기 바이오센서는 의료기관 및 POCT(point-of-care testing) 수준에서 활용되어 비만과 비만 매개 질환의 척도를 손쉽게 확인할 수 있는 의료기기로 활용될 수 있다.
청구항
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| 7 | 인체로부터 분리된 샘플을 a) 스크린 프린트 된 금 전극(screen-printed gold electrode; SPGE); b) 상기 전극 상에 형성된 3,3'-디티오비스(설포숙신이미딜 프로피오네이트)(DTSSP); c) 상기 DTSSP와 결합하며, 렙틴을 포획하는 항-렙틴 포획 항체; d) 렙틴; e) 상기 렙틴을 검출하는, 비오틴이 결합된 항-렙틴 검출 항체; 및 f) 상기 항-렙틴 검출 항체에 결합된 스트렙타비딘-호스래디쉬 퍼옥시다제(HRP)를 포함하며, o-페닐렌디아민(o-Penylenediamine, oPD)을 전자 매개체로서 적용한 것을 특징을 하는 렙틴 검출용 바이오센서에 처리하는 단계를 포함하는, 전기화학적방법을 통한 렙틴 검출방법으로,상기 전기화학적방법은 순환전압전류법(cyclic voltammetry; CV) 또는 사각파전압전류법(square-wave voltammetry; SWV)이며,상기 순환전압전류법은 10 내지 300mV/s의 스캔속도로 0.0 내지 0.2V 전위 범위에서 렙틴을 검출하고,상기 사각파전압전류법은 15 Hz의 주파수 및 0.025V의 진폭으로 -0.6V 내지 -0.5V 범위의 전위에서 렙틴을 검출하는 것을 특징으로 하는 렙틴 검출방법. |
| 8 | 제7항에 있어서, 상기 샘플은 혈액, 혈장, 소변, 타액, 조직 및 뇌척수액으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 검출방법. |
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