목적 단백질의 수용성 발현 증가를 위한 다중 NEXT 태그 및 이의 용도
Multiple NEXT tag for increasing soluble expression of target protein and uses thereof
특허 요약
본 발명은 목적 단백질의 수용성 발현 증가를 위한 다중 NEXT 태그 및 이의 용도에 관한 것으로, 본 발명에 따른 NEXT 태그 서열이 반복되어 연결된 융합 태그는 크기가 작아 목적 단백질의 기능에 영향을 미치지 않으면서 목적 단백질의 수용성 발현량을 증가시키는 효과가 우수하므로, 본 발명의 융합 태그는 의약용, 산업용 및 연구용 등의 재조합 단백질 발현을 위한 벡터 시스템의 기본 구성요소로 활용될 수 있을 것이다.
청구항
번호청구항
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제7항 내지 제9항 중 어느 한 항의 재조합 벡터로 숙주세포를 형질전환하는 단계; 및상기 형질전환된 숙주세포를 배양하여 목적 단백질을 발현시키는 단계;를 포함하는, 숙주세포에서 수용성 발현량이 증가된 목적 단백질의 생산 방법.

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제11항에 있어서, 상기 숙주세포는 대장균인 것을 특징으로 하는 숙주세포에서 수용성 발현량이 증가된 목적 단백질의 생산 방법.

1

서열번호 1의 아미노산 서열이 2반복 이상으로 이루어진 융합 태그.

2

제1항에 있어서, 상기 2반복 이상은 2반복 내지 5반복 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 융합 태그.

3

제1항에 있어서, 상기 융합 태그는 서열번호 2 또는 3의 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 융합 태그.

4

제1항에 있어서, 상기 융합 태그의 C-말단에(GGGGS)2 링커 서열을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 융합 태그.

5

제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 융합 태그를 코딩하는 폴리뉴클레오티드.

6

제5항에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열번호 5 또는 6의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.

7

서열번호 2 또는 3의 아미노산 서열로 이루어진 융합 태그를 코딩하는 폴리뉴클레오티드와 목적 단백질을 코딩하는 유전자가 순차적으로 연결된 것을 특징으로 하는 재조합 벡터.

8

제7항에 있어서, 상기 목적 단백질은 효소, 항원, 항체, 세포수용체, 구조단백질, 혈청 및 세포 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 생물학적 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 재조합 벡터.

9

제7항에 있어서, 상기 목적 단백질은 C-말단에 6XHis 서열을 추가로 갖는 것을 특징으로 하는 재조합 벡터.

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제7항 내지 제9항 중 어느 한 항의 재조합 벡터로 형질전환된 숙주세포.

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서열번호 2 또는 3의 아미노산 서열 중 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어진 융합 태그를 코딩하는 폴리뉴클레오티드와 목적 단백질을 코딩하는 유전자가 순차적으로 연결된 재조합 벡터를 유효성분으로 포함하는, 수용성 발현량이 증가된 목적 단백질의 생산용 조성물.