목질 액체배지와 LED를 이용한 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법
Culture method for enhancing cordycepin content of Paecilomyces javanicus mycelium using woody liquid medium and Light-Emitting Diode
특허 요약
본 발명은 목질 액체배지와 LED를 이용한 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법에 관한 것으로, 눈꽃동충하초 균사를 목질원료가 투입된 배지에 접종하는 접종단계; 및 접종된 배지를 광조건에서 배양하여 배양된 눈꽃동충하초 균사체 및 배양액에서 코디세핀을 얻는 단계; 를 포함하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법으로 이루어져 배지 및 광조건에 따라 눈꽃동충하초 균사체로부터 최대 코디세핀 함량을 수득할 수 있음을 확인하였으며, 반응 표면 분석을 통하여 최적의 목질원료 분말도, 배지의 목질원료 함량 및 배양시간 조건을 도출하고, 이를 배양조건으로 이용함으로써 눈꽃동충하초 균사체로부터 최대 코디세핀 함량을 효율적으로 수득할 수 있다.
청구항
번호청구항
1

100 내지 140 mesh의 분말도를 갖는 목질원료를 1 내지 5% 농도의 NaOH로 전처리하는 단계;눈꽃동충하초 균사를 상기 목질원료가 투입된 배지에 접종하는 접종단계; 및접종된 배지를 광조건에서 배양하여 배양된 눈꽃동충하초 균사체 및 배양액에서 코디세핀을 얻는 단계; 를 포함하고,상기 광조건은 620 nm 내지 780 nm의 파장을 갖는 적색광과 380 nm 내지 500 nm의 파장을 갖는 청색광을 혼합한 LED 혼합광을 접종된 배지에 조사하여 균사체를 배양하는 것을 특징으로 하는,눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법.

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제 1항에 있어서,상기 목질원료는 참나무, 소나무, 삼나무 및 백합나무로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법.

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제 1항에 있어서,상기 목질원료는 액체 배지 1L에 20 내지 40 g으로 포함되는 것을 특징으로 하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법.

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제 1항에 있어서,상기 LED 혼합광을 1일 5 내지 15시간 동안 접종된 배지에 조사하여 균사체를 배양하는 것을 특징으로 하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법.

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제 1항에 있어서,상기 배양은 3일 내지 7일 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법.

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제 1항에 있어서,상기 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량은,목질원료의 분말도, 배지의 목질원료 함량 및 배양시간과 하기의 수학식 1과 같은 상관관계를 가지는 것을 특징으로 하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법:[수학식 1]Y1=1113.38125-16.66562X1+48.70875X2+6.62995X3+0.000125X1X2+0.000026X1X3+5.52129E-17X2X3+0.063312X12-1.3785X22-0.056359X32(상기 수학식 1에서 Y1은 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량(㎍/mL), X1은 목질원료의 분말도, X2는 목질원료의 함량 및 X3는 배양시간을 의미함.)

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제 9항에 있어서,상기 목질원료의 분말도, 배지의 목질원료 함량 및 배양시간의 배양조건은 각각 100 내지 140 mesh, 10 내지 40 g/L, 50 내지 100시간인 것을 특징으로 하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법.

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제 10항에 있어서,상기 목질원료의 분말도, 배지의 목질원료 함량 및 배양시간의 배양조건은 각각 129.763 mesh, 16.8053 g/L, 52.6849 시간인 것을 특징으로 하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 증대하는 배양방법.

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제 1항 내지 제 3항 및 제 7항 내지 제 11항 중 어느 한 항의 방법에 따라 배양된 눈꽃동충하초 균사체로부터 수득된 코디세핀 조성물.

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제 1항 내지 제 3항 및 제 7항 내지 제 11항 중 어느 한 항의 방법에 따라 배양된 눈꽃동충하초 균사체로부터 수득된 코디세핀 조성물을 포함하는 건강기능식품.

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제 1항에 따른 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 예측하는 방법에 있어서,(a) 박스 벤켄 계획법(Box-Behnken design)으로 목질원료의 분말도(X1), 배지의 목질원료의 함량(X2), 배양시간(X3)에 대하여, -1, 0 및 1로 코드화하여 실험범위를 설계하는 단계;(b) 상기 단계 (a)의 설계된 실험범위로, 상기 목질원료의 분말도, 배지의 목질원료의 투입량 및 배양시간에 대한 실험값을 얻는 단계;(c) 상기 단계 (b)의 실험값을 이용하여 하기 수학식 1로 표시되는 이차 회귀식 모델을 도출하는 단계; 및(d) 상기 단계 (c)에서 도출된 수학식 1로 표시되는 이차 회귀식 모델을 변량분석(ANOVA)하여 상기 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량을 예측하는 단계; 를 포함하는 것을 특징으로 하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량 예측방법:[수학식 1]Y1=1113.38125-16.66562X1+48.70875X2+6.62995X3+0.000125X1X2+0.000026X1X3+5.52129E-17X2X3+0.063312X12-1.3785X22-0.056359X32(상기 수학식 1에서 Y1은 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량(㎍/mL), X1은 목질원료의 분말도(코드단위), X2는 목질원료의 함량(코드단위) 및 X3는 배양시간(코드단위)을 의미함.)

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제 14항에 있어서,상기 목질원료의 분말도, 배지의 목질원료 함량 및 배양시간의 배양조건은 각각 100 내지 140 mesh, 20 내지 40 g/L, 50 내지 100시간인 것을 특징으로 하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량 예측방법.

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제 15항에 있어서,상기 목질원료의 분말도, 배지의 목질원료 함량 및 배양시간의 배양조건은 각각 129.763 mesh, 16.8053 g/L, 52.6849 시간인 것을 특징으로 하는 눈꽃동충하초 균사체의 코디세핀 함량 예측방법.