| 번호 | 청구항 |
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| 1 | 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포를 10 내지 100 ng/ml의 혈관내피성장인자(vascular endothelial growth factor, VEGF)가 포함된 내피세포 성장 기저 배양액(endothelial cell growth basal medium)으로 배양하는 단계를 포함하는, 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포의 혈관내피세포로의 분화 유도 방법. |
| 2 | 제 1항에 있어서,상기 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포는 하기와 같은 단계를 통해 수득되는 것을 특징으로 하는, 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포의 혈관내피세포로의 분화 유도 방법:a) 돼지 체내수정란의 배반엽 상층으로부터 세포덩어리를 분리하는 단계;b) 상기 분리한 세포덩어리를 배양보조세포 위에서 배양하는 단계;c) 상기 배양된 세포덩어리로부터 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포와 배양보조세포를 분리하는 단계; 및d) 상기 분리된 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포의 알칼리인산분해효소(Alkaline Phosphatase, AP)의 발현 여부를 확인하여 선별하는 단계. |
| 3 | 제 2항에 있어서,상기 d) 단계에 있어서, AP가 발현되지 않는 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포를 선별하는 것을 특징으로 하는, 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포의 혈관내피세포로의 분화 유도 방법. |
| 4 | 제 1항에 있어서,상기 내피세포 성장 기저 배양액은 EBM-2(Endothelial Cell Growth Medium-2) 배양액인 것을 특징으로 하는, 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포의 혈관내피세포로의 분화 유도 방법. |
| 5 | 제 2항에 있어서,상기 b)단계 중 상기 세포덩어리는 배양 3 내지 5일 마다 콜라겐분해효소 및 디스파제(Dispase)가 혼합된 혼합효소로 20 내지 50℃에서 5분 내지 30분 동안 처리된 후 배양보조세포 위에서 배양되는 것을 특징으로 하는, 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포의 혈관내피세포로의 분화 유도 방법. |
| 6 | 제 5항에 있어서,상기 혼합효소는 콜라겐분해효소 및 디스파제가 1:1의 비율로 혼합된 것을 특징으로 하는, 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포의 혈관내피세포로의 분화 유도 방법. |
| 7 | 제 2항에 있어서, 상기 배양보조세포는 비활성화된 생쥐배아섬유아세포(Irradiated Mouse Embryonic Fibroblasts, iMEF)인 것을 특징으로 하는, 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포의 혈관내피세포로의 분화 유도 방법. |
| 8 | 10 내지 100 ng/ml의 혈관내피성장인자(vascular endothelial growth factor, VEGF) 및 내피세포 성장 기저 배양액을 포함하는 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포의 혈관내피세포로의 분화 유도용 배지 조성물. |
| 9 | 10 내지 100 ng/ml의 혈관내피성장인자(vascular endothelial growth factor, VEGF) 및 내피세포 성장 기저 배양액을 포함하는 돼지 배반엽 상층 유래 줄기세포의 혈관내피세포로의 분화 유도용 키트. |