비멘틴 자가항원 병인 특이 폐와 피부 섬유증 악화 유도 전신경화증 모델링 플랫폼
Vimentin autoantigen etiologic specific lung and skin fibrosis exacerbation-induced systemic sclerosis modeling platform
특허 요약
본 발명은 비멘틴 자가항원 병인 특이 폐와 피부 섬유증 악화 유도 전신경화증 모델링 플랫폼에 관한 것으로, 본 발명은 비멘틴 단백질이 전신경화증 동물모델에서, 피부 섬유화를 증가시키는 것을 확인하였으며, CD206 양성 M2 대식세포, Th2 및 profibrotic T 세포의 활성을 증가시키고, 혈청 내 비멘틴 특이적 자가항체의 발현을 증가시키는 것을 확인하였다. 또한, 전신경화증이 과활성화되는 IL-1Ra KO 마우스에서, 비멘틴 펩타이드 단독 주입으로, 전신경화증이 유도되어, 면역 불균형이 유도되고, 혈청 내 비멘틴 펩타이드 특이적 자가항체의 발현이 증가하고, 조직 섬유화를 유도하는 것을 확인하였다. 또한, 전신경화증 매개 인터페론인 INFγ 결핍 동물모델에서, 비멘틴 펩타이드가 전신경화증을 유도하고, 면역불균형 및 혈청 내 비멘틴 펩타이드 특이적 자가항체의 발현을 증가시키고, 조직 섬유화를 유도하는 것을 확인하였다. 상기의 결과로, 본 발명은 비멘틴 변이 단백질 및 펩타이드가, 전신경화증 및 조직 섬유화의 병증 활성도를 증가시키는 것을 확인하여, 비멘틴 변이 단백질 관련 전신경화증의 동물모델 및 이를 이용한 치료제 스크리닝 분야에 유용하게 이용할 수 있다.
청구항
번호청구항
8

제 5항에 있어서,상기 면역 결핍 마우스는, 자가 면역 유도 마우스를 더 포함하는 것인, 동물모델.

9

제 8항에 있어서,상기 자가 면역 유도는 인터페론 감마(interferon gamma, INFγ)의 녹아웃(knockout)으로 유도되는 것인, 동물모델.

10

제 1항에 있어서,상기 동물모델은 면역 세포의 불균형이 유도된 것인, 동물모델.

6

제 5항에 있어서,상기 면역 결핍 마우스는, 면역 반응 과활성 마우스를 더 포함하는 것인, 동물모델.

7

제 6항에 있어서,상기 면역 과활성은 IL-1Ra(IL-1 receptor-antagonist)의 녹아웃(knockout)으로 유도되는 것인, 동물모델.

1

마우스에 비멘틴 단백질(vimentin protein) 또는 비멘틴 펩타이드(vimentin peptide)로 면역화를 시키는 단계; 및상기 면역화 마우스에, 전신경화증을 유도하는 단계;를 포함하는 전신경화증 질병 과활성 동물모델.

2

제 1항에 있어서,상기 비멘틴 단백질은, 서열번호 1의 염기서열로 암호화되는 것인, 동물모델.

3

제 1항에 있어서,상기 비멘틴 단백질은, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 것인, 동물모델.

4

제 1항에 있어서,상기 비멘틴 펩타이드는, 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 것인, 동물모델.

5

제 1항에 있어서,상기 마우스는, 면역 결핍 마우스인 것인, 동물모델.

11

제 10항에 있어서,상기 면역 세포의 불균형은 M1 대식세포 또는 tolerogenic dendritic cells의 발현이 대조군의 기준치와 비교하여 감소된 것인, 동물모델.

12

제 10항에 있어서,상기 면역 세포의 불균형은 성숙 수지상세포(mature dendritic cell) 또는 M2 대식세포의 발현이 대조군의 기준치와 비교하여 증가된 것인, 동물모델.

13

제 1항에 있어서,상기 동물모델은, 대조군의 기준치와 비교하여, 전섬유화 T 세포(profibrotic T cell)의 발현이 증가된 것인, 동물모델.

14

제 1항에 있어서,상기 동물모델은 자가항체의 발현이 대조군의 기준치와 비교하여 증가된 것인, 동물모델.

15

제 14항에 있어서,상기 자가항체는 비멘틴 특이적 IgG(vimentin specific IgG)인 것인, 동물모델.

16

제 15항에 있어서,상기 비멘틴은 비멘틴 단백질(vimentin protein) 또는 비멘틴 펩타이드(vimentin peptide)인 것인, 동물모델.

17

제 1항에 있어서,상기 동물모델은 대조군의 기준치와 비교하여, 조직 섬유화가 증가된 것인, 동물모델.

18

제 17항에 있어서,상기 조직은 피부, 폐, 간, 근육, 신장, 장 및 비장으로 이루어진 군에서 선택된 조직인 것인, 동물모델.

19

제 17항에 있어서,상기 조직 섬유화는, 피부 두께가 증가하는 것인, 동물모델.

20

제 17항에 있어서,상기 조직 섬유화는, 조직 내 섬유화 인자인 IL-4 또는 a-SMA의 발현이 증가하는 것인, 동물모델.

21

제 17항에 있어서,상기 조직 섬유화는, 조직 내 비멘틴 변이 단백질의 활성이 증가된 것인, 동물모델.

22

제 21항에 있어서,상기 비멘틴 변이 단백질은 세포 표면 비멘틴(cell surface vimentin)인 것인, 동물모델.

23

마우스에 비멘틴 단백질(vimentin protein) 또는 비멘틴 펩타이드(vimentin peptide)를 주입하여 면역화를 시키는 단계; 및상기 면역화 마우스에, 전신경화증을 유도하는 단계;를 포함하는 전신경화증 질병 과활성 동물모델의 제작 방법.

24

제 23항에 있어서,상기 면역화는 완전 보조제(Complete Freud's adjuvant) 또는 불완전 보조제(incomplete Freud's adjuvant)로 유도하는 것인, 방법.

25

제 23항에 있어서,상기 전신경화증의 유도는 비멘틴 단백질, 비멘틴 펩타이드 또는 블레오마이신(bleomycin)으로 유도하는 것인, 방법.

26

제 1항의 동물모델에 후보 물질을 처리하는 단계; 및상기 후보 물질이 처리된 동물모델의 전신경화증 병증을 확인하는 단계;를 포함하는 전신경화증 치료제의 스크리닝 방법.

27

제 26항에 있어서,상기 전신경화증은, 비멘틴 변이 단백질로 유도되는 것인, 방법.

28

제 27항에 있어서,상기 비멘틴 변이 단백질은, 전신경화증의 질병 활성도를 증가시키는 것인, 방법.

29

제 27항에 있어서,상기 비멘틴 변이 단백질은, 세포 표면 비멘틴(cell surface vimentin)인 것인, 방법.

30

제 26항에 있어서,상기 후보 물질은 전신경화증의 면역 불균형을 개선시키는 것인, 방법.

31

제 30항에 있어서,상기 면역 불균형을 개선시키는 것은, M1 대식세포 또는 tolerogenic dendritic cells의 발현을 대조군의 기준치와 비교하여 증가시키는 것인, 방법.

32

제 30항에 있어서,상기 면역 불균형을 개선시키는 것은, 성숙 수지상세포(mature dendritic cell) 또는 M2 대식세포의 발현을 대조군의 기준치와 비교하여 감소시키는 것인, 방법.

33

제 26항에 있어서,상기 후보물질은, 대조군의 기준치와 비교하여 전섬유화 T 세포(profibrotic T cell)의 발현을 감소시키는 것인, 방법.

34

제 26항에 있어서,상기 후보물질은, 대조군의 기준치와 비교하여 자가항체의 발현을 감소시키는 것인, 방법.

35

제 34항에 있어서,상기 자가항체는 비멘틴 특이적 IgG(vimentin specific IgG)인 것인, 방법.

36

제 35항에 있어서,상기 비멘틴은 비멘틴 단백질(vimentin protein) 또는 비멘틴 펩타이드(vimentin peptide)인 것인, 방법.

37

제 26항에 있어서,상기 후보물질은 대조군의 기준치와 비교하여, 조직 섬유화를 감소시키는 것인, 방법.

38

제 37항에 있어서,상기 조직은 피부, 폐, 간, 근육, 신장, 장 및 비장으로 이루어진 군에서 선택된 조직인 것인, 방법.

39

제 26항에 있어서,상기 후보물질은, 대조군의 기준치와 비교하여, 피부 두께를 감소시키는 것인, 방법.

40

제 26항에 있어서,상기 후보물질은 대조군의 기준치와 비교하여, 조직 내 섬유화 인자인 IL-4, a-SMA 또는 세포 표면 비멘틴(cell surface vimentin)의 발현을 감소시키는 것인, 방법.