상분리 현상을 실시간으로 검출하는, G3BP1 유전자의 엑손 12의 3'-말단에 피부 자극성 평가용 형광 리포터가 도입된 인간 피부 세포주.

제1항에 있어서, 상기 상분리 현상은 스트레스 과립 형성인 것을 특징으로 하는 G3BP1 유전자의 엑손 12의 3'-말단에 피부 자극성 평가용 형광 리포터가 도입된 인간 피부 세포주.

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제1항에 있어서, 상기 피부 자극성 평가용 형광 리포터는 파이어플라이 루시퍼라제(firefly luciferase), 레닐라 루시퍼라제(renilla luciferase), 녹색 형광 단백질(green fluorescent protein, GFP), 변형된 녹색 형광 단백질(modified green fluorescent protein), 증강된 녹색 형광 단백질(enhanced green fluorescent protein, EGFP), 적색 형광 단백질(red fluorescent protein, RFP), 증강된 적색 형광 단백질(enhanced red fluorescent protein, ERFP), 청색 형광 단백질(blue fluorescent protein, BFP), 증강된 청색 형광 단백질(enhanced blue fluorescent protein, EBFP), 황색 형광 단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 증강된 황색 형광 단백질(enhanced yellow fluorescent protein, EYFP), 남색 형광 단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 증강된 남색 형광 단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP) 및 DsRed로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 G3BP1 유전자의 엑손 12의 3'-말단에 피부 자극성 평가용 형광 리포터가 도입된 인간 피부 세포주.

제1항에 있어서, 상기 피부 자극성 평가용 형광 리포터가 도입된 인간 피부 세포주는 CRISPR-Cas9 시스템을 이용하여 G3BP1 유전자의 엑손 12의 3'-말단에, 파이어플라이 루시퍼라제(firefly luciferase), 레닐라 루시퍼라제(renilla luciferase), 녹색 형광 단백질(green fluorescent protein, GFP), 변형된 녹색 형광 단백질(modified green fluorescent protein), 증강된 녹색 형광 단백질(enhanced green fluorescent protein, EGFP), 적색 형광 단백질(red fluorescent protein, RFP), 증강된 적색 형광 단백질(enhanced red fluorescent protein, ERFP), 청색 형광 단백질(blue fluorescent protein, BFP), 증강된 청색 형광 단백질(enhanced blue fluorescent protein, EBFP), 황색 형광 단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 증강된 황색 형광 단백질(enhanced yellow fluorescent protein, EYFP), 남색 형광 단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 증강된 남색 형광 단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP) 및 DsRed로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나의 형광표지인자가 도입된 것을 특징으로 하는 G3BP1 유전자의 엑손 12의 3'-말단에 피부 자극성 평가용 형광 리포터가 도입된 인간 피부 세포주.

제1항, 제2항, 제4항 및 제5항 중에서 선택된 어느 한 항의 인간 피부 세포주를 포함하며, 농약; 생활화학 제품 또는 산업용 화학물질; 및 박테리아 또는 바이러스를 포함하는 생물학적 유해인자; 중 어느 하나에 의해 유발된 피부 자극성 평가용 조성물.

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제6항에 있어서, 상기 생활화학 제품 또는 산업용 화학물질은 아비산나트륨(NaAsO2) 또는 BPA(Bisphenol A)인 것을 특징으로 하는 피부 자극성 평가용 조성물.

제1항, 제2항, 제4항 및 제5항 중에서 선택된 어느 한 항의 인간 피부 세포주를 포함하며, 농약; 생활화학 제품 또는 산업용 화학물질; 및 박테리아 또는 바이러스를 포함하는 생물학적 유해인자; 중 어느 하나의 피부 자극 유발 물질 스크리닝용 조성물.

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서열번호 1의 염기서열로 이루어진 sgRNA를 포함하는 CRISPR-Cas9-sgRNA 벡터; 및 G3BP1 유전자에 형광표지인자 도입을 위한 유전자 삽입(Knock-in) 벡터;로 피부 세포를 형질감염시켜 G3BP1 유전자의 엑손 12의 3'-말단에 형광표지인자를 도입하는 단계;를 포함하는 피부 자극성 평가용 형광 리포터가 도입된 인간 피부 세포주의 제조방법.

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1. 제1항, 제2항, 제4항 및 제5항 중에서 선택된 어느 한 항의 인간 피부 세포주에 피부 자극성 평가용 시험물질을 처리하는 단계; 및2) 상기 단계 1) 이후에, 실시간 상분리 현상을 확인하는 단계;를 포함하는 피부 자극성 물질의 스크리닝 방법.

제14항에 있어서, 상기 실시간 상분리 현상을 확인하는 단계는 시험물질을 처리하지 않은 대조군에 대비하여 스트레스 과립 형성 정도를 확인하는 것을 특징으로 하는 피부 자극성 물질의 스크리닝 방법.