형질전환 정원줄기세포의 생산방법
METHOD FOR PRODUCING TRANSGENIC SPERMATOGONIAL STEM CELLS
특허 요약
본 발명은 동물의 정원줄기세포를 분리하는 단계, 상기 분리한 정원줄기세포에 원적외선을 조사하는 단계 및 상기 정원줄기세포에 형질전환을 유도하는 단계를 포함하는 형질전환 정원줄기세포의 생산방법에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
1

인간을 제외한 포유동물의 정원줄기세포를 분리하는 단계;상기 분리한 정원줄기세포에 원적외선을 조사하는 단계; 및상기 정원줄기세포에 형질전환을 유도하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 정원줄기세포의 생산방법.

2

제 1 항에 있어서,상기 원적외선을 조사하는 단계는 5분 내지 15분 범위로 이루어지는 것을 특징으로 하는 형질전환 정원줄기세포의 생산방법.

3

제 1 항에 있어서,상기 정원줄기세포에 형질전환을 유도하는 단계는 물리적 유전자 전달 방법으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 형질전환 정원줄기세포의 생산방법.

4

제 3 항에 있어서,상기 물리적 유전자 전달 방법은 전기천공법(electroporation)으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 형질전환 정원줄기세포의 생산방법.

5

삭제

6

제 1 항에 있어서,상기 인간을 제외한 포유동물은 돼지인 것을 특징으로 하는 형질전환 정원줄기세포의 생산방법.

7

제 1 항에 있어서,상기 인간을 제외한 포유동물의 정원줄기세포를 분리하는 단계는,상기 인간을 제외한 포유동물의 정소에 효소를 처리하여 정소세포를 분리하는 단계;상기 분리한 정소세포를 1차 배양한 후, 1차 부유 세포를 회수하는 단계; 및상기 회수한 부유 세포를 2차 배양한 후, 2차 부유 세포를 회수하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 정원줄기세포의 생산방법.

8

제 1 항에 있어서,상기 인간을 제외한 포유동물의 정원줄기세포를 분리하는 단계 이후에 상기 분리한 정원줄기세포를 배양하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 정원줄기세포의 생산방법.

9

제 8 항에 있어서,상기 분리한 정원줄기세포를 배양하는 단계는,상기 분리한 정원줄기세포를 배양액을 이용하여 습식 세포 배양기에서 배양하는 것을 특징으로 하는 형질전환 정원줄기세포의 생산방법.

10

제 1 항의 방법으로 생산된 형질전환 정원줄기세포를 배양하여 생식세포로 분화시키는 단계; 및상기 분화된 생식세포를 인간을 제외한 포유동물인 수여동물(recipient)의 정소 내에 이식하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 정자의 생산방법.

11

제 10 항에 있어서,상기 분화된 생식세포의 이식은 상기 인간을 제외한 포유동물인 수여동물(recipient)의 정소망을 통해 이식하는 것을 특징으로 하는 형질전환 정자의 생산방법.

12

제 10 항에 있어서,상기 분화된 생식세포의 이식은 상기 인간을 제외한 포유동물인 수여동물(recipient)의 세정관 내에 이식하는 것을 특징으로 하는 형질전환 정자의 생산방법.