클로렐라 불가리스 균주를 이용한 리튬 침출용 조성물 및 리튬 침출 방법
Composition for lithium leaching and method of lithium leaching using Chlorella vulgaris strain
특허 요약
본 발명은 클로렐라 불가리스 (Chlorella vulgaris) 균주를 이용한 리튬 침출용 조성물 및 리튬 침출 방법에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
12

제2항에 있어서, 상기 벡터는 금 입자 충격법 (gold particles bombardment)을 이용한 미세조류 형질전환용인 것인, 리튬 침출용 조성물.

13

클로렐라 불가리스 (Chlorella vulgaris) 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물 및 상기 배양물의 건조물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 리튬을 포함하는 물질과 혼합하는 혼합 단계, 및소정 시간 동안 리튬을 침출하는 침출 단계를 포함하는, 바이오리칭을 통한 리튬 침출 방법.

1

클로렐라 불가리스 (Chlorella vulgaris) 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물 및 상기 배양물의 건조물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는, 리튬 침출용 조성물.

2

제1항에 있어서, 상기 균주는 다음을 포함하는 벡터로 형질전환된 것인, 리튬 침출용 조성물:Coccomyxa C-169 ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (RuBisCo) small subunit 2 (rbcS2) 유전자의 프로모터; Coccomyxa subellipsoidea C-169의 beta-type carbonic anhydrase-코딩 뉴클레오타이드 서열; 및 Coccomyxa C-169 rbcS2 유전자의 터미네이터 서열.

3

제2항에 있어서, 상기 프로모터는 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것인, 리튬 침출용 조성물.

4

제2항에 있어서, 상기 Coccomyxa subellipsoidea C-169의 beta-type carbonic anhydrase-코딩 뉴클레오타이드 서열은 프로모터에 작동적으로 결합되어 (operatively linked) 있는 것인, 리튬 침출용 조성물.

5

제2항에 있어서, 상기 터미네이터 서열은 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 것인, 리튬 침출용 조성물.

6

제2항에 있어서, 상기 벡터는 선택 표지로 항생제 내성 유전자를 추가로 포함하는 것인, 리튬 침출용 조성물.

7

제6항에 있어서, 상기 항생제는 스펙티노마이신, 파로모마이신, 앰피실린, 제오신 및 블레오마이신으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 리튬 침출용 조성물.

8

제2항에 있어서, 상기 벡터는 리포터 분자를 코딩하는 유전자를 추가로 포함하는 것인, 리튬 침출용 조성물.

9

제8항에 있어서, 상기 리포터 분자는 성장 촉진 단백질, 형광 단백질 및 가수 분해 효소로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 리튬 침출용 조성물.

10

제9항에 있어서, 상기 형광 단백질은 루시퍼라아제인 것인, 리튬 침출용 조성물.

11

제9항에 있어서, 상기 가수 분해 효소는 β-글루쿠로니다아제인 것인, 리튬 침출용 조성물.

14

제13항에 있어서, 상기 리튬 침출 방법은 상기 혼합 단계 전에 다음의 형질전환 단계를 포함하며, 상기 혼합 단계의 클로렐라 불가리스 균주는 형질전환된 클로렐라 불가리스 균주인 것인, 리튬 침출 방법:Coccomyxa C-169 ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (RuBisCo) small subunit 2 (rbcS2) 유전자의 프로모터, Coccomyxa subellipsoidea C-169의 beta-type carbonic anhydrase-코딩 뉴클레오타이드 서열, 및 Coccomyxa C-169 rbcS2 유전자의 터미네이터 서열을 포함하는 벡터를 클로렐라 불가리스에 도입하는 형질전환 단계.

15

제14항에 있어서, 상기 프로모터는 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것인, 리튬 침출 방법.

16

제14항에 있어서, 상기 Coccomyxa subellipsoidea C-169의 beta-type carbonic anhydrase-코딩 뉴클레오타이드 서열은 프로모터에 작동적으로 결합되어 (operatively linked) 있는 것인, 리튬 침출 방법.

17

제14항에 있어서, 상기 터미네이터 서열은 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 것인, 리튬 침출 방법.

18

제14항에 있어서, 상기 벡터는 선택 표지로 항생제 내성 유전자를 추가로 포함하는 것인, 리튬 침출 방법.

19

제18항에 있어서, 상기 항생제는 스펙티노마이신, 파로모마이신, 앰피실린, 제오신 및 블레오마이신으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 리튬 침출 방법.

20

제14항에 있어서, 상기 벡터는 리포터 분자를 코딩하는 유전자를 추가로 포함하는 것인, 리튬 침출 방법.

21

제20항에 있어서, 상기 리포터 분자는 성장 촉진 단백질, 형광 단백질 및 가수 분해 효소로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 리튬 침출 방법.

22

제21항에 있어서, 상기 형광 단백질은 루시퍼라아제인 것인, 리튬 침출 방법.

23

제21항에 있어서, 상기 가수 분해 효소는 β-글루쿠로니다아제인 것인, 리튬 침출 방법.

24

제14항에 있어서, 상기 벡터는 금 입자 충격법 (gold particles bombardment)을 이용한 미세조류 형질전환용인 것인, 리튬 침출 방법.

25

제14항에 있어서, 상기 형질전환 단계는 금 입자 충격법 (gold particles bombardment)을 이용하여 수행하는 것인, 리튬 침출 방법.

26

제14항에 있어서, 상기 형질전환 단계의 셀 스테이지는 로그 페이즈인 것인, 리튬 침출 방법.

27

제26항에 있어서, 상기 로그 페이즈는 OD686 값이 0.4 내지 0.6인 것인, 리튬 침출 방법.

28

제14항에 있어서, 상기 형질전환 단계의 세포 밀도는 5.0106 내지 8.0107 per 60mm Diameter인 것인, 리튬 침출 방법.

29

제14항에 있어서, 상기 형질전환 단계의 배큠은 27.0 내지 29.0 inchs Hg인 것인, 리튬 침출 방법.

1

제14항에 있어서, 상기 형질전환 단계는 금 입자 충격법 (gold particles bombardment)을 이용하여 수행하는 것인, 리튬 침출 방법.

1

제14항에 있어서, 상기 형질전환 단계의 셀 스테이지는 로그 페이즈인 것인, 리튬 침출 방법.

1

제26항에 있어서, 상기 로그 페이즈는 OD686 값이 0.4 내지 0.6인 것인, 리튬 침출 방법.

1

제14항에 있어서, 상기 형질전환 단계의 세포 밀도는 5.0106 내지 8.0107 per 60mm Diameter인 것인, 리튬 침출 방법.

1

제14항에 있어서, 상기 형질전환 단계의 배큠은 27.0 내지 29.0 inchs Hg인 것인, 리튬 침출 방법.

1

제21항에 있어서, 상기 가수 분해 효소는 β-글루쿠로니다아제인 것인, 리튬 침출 방법.

1

제14항에 있어서, 상기 벡터는 금 입자 충격법 (gold particles bombardment)을 이용한 미세조류 형질전환용인 것인, 리튬 침출 방법.

1

클로렐라 불가리스 (Chlorella vulgaris) 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물 및 상기 배양물의 건조물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는, 리튬 침출용 조성물.

1

제1항에 있어서, 상기 균주는 다음을 포함하는 벡터로 형질전환된 것인, 리튬 침출용 조성물:Coccomyxa C-169 ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (RuBisCo) small subunit 2 (rbcS2) 유전자의 프로모터; Coccomyxa subellipsoidea C-169의 beta-type carbonic anhydrase-코딩 뉴클레오타이드 서열; 및 Coccomyxa C-169 rbcS2 유전자의 터미네이터 서열.

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제2항에 있어서, 상기 프로모터는 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것인, 리튬 침출용 조성물.

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제2항에 있어서, 상기 Coccomyxa subellipsoidea C-169의 beta-type carbonic anhydrase-코딩 뉴클레오타이드 서열은 프로모터에 작동적으로 결합되어 (operatively linked) 있는 것인, 리튬 침출용 조성물.

1

제2항에 있어서, 상기 터미네이터 서열은 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 것인, 리튬 침출용 조성물.

1

제2항에 있어서, 상기 벡터는 선택 표지로 항생제 내성 유전자를 추가로 포함하는 것인, 리튬 침출용 조성물.

1

제6항에 있어서, 상기 항생제는 스펙티노마이신, 파로모마이신, 앰피실린, 제오신 및 블레오마이신으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 리튬 침출용 조성물.

1

제2항에 있어서, 상기 벡터는 리포터 분자를 코딩하는 유전자를 추가로 포함하는 것인, 리튬 침출용 조성물.

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제8항에 있어서, 상기 리포터 분자는 성장 촉진 단백질, 형광 단백질 및 가수 분해 효소로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 리튬 침출용 조성물.

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제9항에 있어서, 상기 형광 단백질은 루시퍼라아제인 것인, 리튬 침출용 조성물.

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제9항에 있어서, 상기 가수 분해 효소는 β-글루쿠로니다아제인 것인, 리튬 침출용 조성물.

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제2항에 있어서, 상기 벡터는 금 입자 충격법 (gold particles bombardment)을 이용한 미세조류 형질전환용인 것인, 리튬 침출용 조성물.

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클로렐라 불가리스 (Chlorella vulgaris) 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물 및 상기 배양물의 건조물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 리튬을 포함하는 물질과 혼합하는 혼합 단계, 및소정 시간 동안 리튬을 침출하는 침출 단계를 포함하는, 바이오리칭을 통한 리튬 침출 방법.

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제13항에 있어서, 상기 리튬 침출 방법은 상기 혼합 단계 전에 다음의 형질전환 단계를 포함하며, 상기 혼합 단계의 클로렐라 불가리스 균주는 형질전환된 클로렐라 불가리스 균주인 것인, 리튬 침출 방법:Coccomyxa C-169 ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (RuBisCo) small subunit 2 (rbcS2) 유전자의 프로모터, Coccomyxa subellipsoidea C-169의 beta-type carbonic anhydrase-코딩 뉴클레오타이드 서열, 및 Coccomyxa C-169 rbcS2 유전자의 터미네이터 서열을 포함하는 벡터를 클로렐라 불가리스에 도입하는 형질전환 단계.

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제14항에 있어서, 상기 프로모터는 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것인, 리튬 침출 방법.

1

제14항에 있어서, 상기 Coccomyxa subellipsoidea C-169의 beta-type carbonic anhydrase-코딩 뉴클레오타이드 서열은 프로모터에 작동적으로 결합되어 (operatively linked) 있는 것인, 리튬 침출 방법.

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제14항에 있어서, 상기 터미네이터 서열은 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 것인, 리튬 침출 방법.

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제14항에 있어서, 상기 벡터는 선택 표지로 항생제 내성 유전자를 추가로 포함하는 것인, 리튬 침출 방법.

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제18항에 있어서, 상기 항생제는 스펙티노마이신, 파로모마이신, 앰피실린, 제오신 및 블레오마이신으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 리튬 침출 방법.

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제14항에 있어서, 상기 벡터는 리포터 분자를 코딩하는 유전자를 추가로 포함하는 것인, 리튬 침출 방법.

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제20항에 있어서, 상기 리포터 분자는 성장 촉진 단백질, 형광 단백질 및 가수 분해 효소로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 리튬 침출 방법.

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제21항에 있어서, 상기 형광 단백질은 루시퍼라아제인 것인, 리튬 침출 방법.