스트렙-태그를 포함하는 클로스트리디움 디피실리 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소 및 이를 이용한 메틸글라이옥살의 제조 방법
Methylglyoxal synthase from Clostridium difficile 630 strain attatched strep-tag, and method for producing methylglyoxal using thereof
특허 요약
본 발명은 폴리펩타이드인 스트렙-태그를 포함하는 클로스트리디움 디피실리 (Clostridium difficile) 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소, 이를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드, 상기 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 벡터, 상기 재조합 벡터가 도입된 형질전환 미생물 및 상기 메틸글라이옥살 합성효소를 이용한 메틸글라이옥살의 제조 방법에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
1

스트렙-태그를 포함하는 클로스트리디움 디피실리 (Clostridium difficile) 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소에 있어서,상기 스트렙-태그는 클로스트리디움 디피실리 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소의 N-말단에 결합된 것인, 합성효소.

2

제1항에 있어서, 상기 메틸글라이옥살 합성효소는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 것인, 메틸글라이옥살 합성효소.

3

제1항에 있어서, 상기 스트렙-태그는 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 것인, 메틸글라이옥살 합성효소.

4

삭제

5

제1항에 있어서, 상기 메틸글라이옥살 합성효소는 pH 5 내지 7에서 0.139 U/mg 이상의 비활성을 갖는 것인, 메틸글라이옥살 합성효소.

6

제1항에 있어서, 상기 메틸글라이옥살 합성효소는 20 내지 65 ℃에서 0.063 U/mg 이상의 비활성을 갖는 것인, 메틸글라이옥살 합성효소.

7

스트렙-태그를 코딩하는 염기서열 및 클로스트리디움 디피실리 (Clostridium difficile) 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소를 코딩하는 염기서열을 포함하는 폴리뉴클레오타이드에 있어서,상기 스트렙-태그를 코딩하는 염기서열은 클로스트리디움 디피실리 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소를 코딩하는 염기서열의 5`-말단에 결합된 것인, 폴리뉴클레오타이드.

8

제7항에 있어서, 상기 클로스트리디움 디피실리 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소를 코딩하는 염기서열은 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것인, 폴리뉴클레오타이드.

9

제7항에 있어서, 상기 스트렙-태그를 코딩하는 염기서열은 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 것인, 폴리뉴클레오타이드.

10

삭제

11

스트렙-태그를 코딩하는 염기서열 및 클로스트리디움 디피실리 (Clostridium difficile) 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소를 코딩하는 염기서열을 포함하고,상기 스트렙-태그를 코딩하는 염기서열은 메틸글라이옥살 합성효소를 코딩하는 염기서열의 5`-말단에 결합된 것인, 재조합 벡터.

12

제11항에 있어서, 상기 스트렙-태그를 코딩하는 염기서열은 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 재조합 벡터.

13

제11항에 있어서, 상기 메틸글라이옥살 합성효소를 코딩하는 염기서열은 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것인, 재조합 벡터.

14

삭제

15

스트렙-태그를 코딩하는 염기서열 및 클로스트리디움 디피실리 (Clostridium difficile) 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소를 코딩하는 염기서열을 포함하고,상기 스트렙-태그를 코딩하는 염기서열은 메틸글라이옥살 합성효소를 코딩하는 염기서열의 5`-말단에 결합된 재조합 벡터가 도입된 형질전환 미생물.

16

제15항에 있어서, 상기 스트렙-태그를 코딩하는 염기서열은 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 것인, 형질전환 미생물.

17

제15항에 있어서, 상기 메틸글라이옥살 합성효소를 코딩하는 염기서열은 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것인, 형질전환 미생물.

18

삭제

19

스트렙-태그를 포함하는 클로스트리디움 디피실리 (Clostridium difficile) 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소에 기질을 첨가하여 메틸글라이옥살을 합성하는 효소 반응 단계;를 포함하고,상기 스트렙-태그는 클로스트리디움 디피실리 630 균주 유래 메틸글라이옥살 합성효소의 N-말단에 결합된 것인, 메틸글라이옥살의 제조 방법.

20

제19항에 있어서, 상기 기질은 디히드록시아세톤 인산인 것인, 메틸글라이옥살의 제조 방법.

21

제19항에 있어서, 상기 효소 반응 단계는 pH 5 내지 7의 조건에서 수행되는 것인, 메틸글라이옥살의 제조 방법.

22

제19항에 있어서, 상기 효소 반응 단계는 20 내지 65 ℃의 온도 조건에서 수행되는 것인, 메틸글라이옥살의 제조 방법.