양자점-라텍스 비드-인플루엔자 바이러스 항체 복합체를 이용한 인플루엔자 바이러스 검출용 키트 및 이를 이용한 검출 방법
Kit for detecting influenza virus using quantum dot-latex bead-influenza virus antibody complex and detecting method using the same
특허 요약
본 발명은 라텍스 비드에 친수성 화합물이 코팅된 양자점이 결합되고, 상기 라텍스 비드에서 양자점과 결합하지 않는 표면에 인플루엔자 바이러스 항체가 결합된 양자점-라텍스 비드-인플루엔자 바이러스 항체 복합체를 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물, 이를 포함하는 인플루엔자 바이러스 검출용 키트 및 인플루엔자 바이러스 검출방법에 관한 것이다. 상기 양자점은 반도체 물질로 이루어진 나노입자이며, 양자점 나노입자는 크기에 따라 특정 파장에서 발광하는 특징이 있을 뿐만 아니라, 종래의 형광물질보다 반치폭이 좁아서 신호의 중첩없이 다양한 신호를 동시에 획득할 수 있으며, 특히 본 발명에 따른 양자점-라텍스 비드-인플루엔자 바이러스 항체 복합체를 건조시켜 키트에 적용하는 것이 가능하므로, 편리할 뿐만 아니라, 장기간 이용하는데 매우 유용하다.
청구항
번호청구항
1

라텍스 비드에 친수성 화합물이 코팅된 양자점이 결합되고, 상기 라텍스 비드 표면에 인플루엔자 바이러스 항체가 결합된 양자점-라텍스 비드-인플루엔자 바이러스 항체 복합체를 유효성분으로 포함하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물.

2

제1항에 있어서, 상기 라텍스 비드 및 친수성 화합물이 코팅된 양자점은 1:50~1,000의 몰비로 결합된 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물.

3

제1항에 있어서, 상기 라텍스 비드 및 인플루엔자 바이러스 항체는 1:50~500의 몰비로 결합된 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물.

4

제1항에 있어서, 상기 라텍스 비드의 직경은 10~2,000nm인 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물.

5

제1항에 있어서, 상기 친수성 화합물이 코팅된 양자점의 직경은 130nm이고, 발광파장은 450700nm인 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물.

6

제2항에 있어서, 상기 라텍스 비드와 친수성 화합물이 코팅된 양자점의 결합은 라텍스 비드 표면에 있는 아미노기와 양자점에 포함된 카르복실기 사이의 아마이드 결합인 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물.

7

제3항에 있어서, 상기 라텍스 비드와 인플루엔자 바이러스 항체의 결합은 라텍스 비드 표면에 있는 카르복실기와 인플루엔자 바이러스 항체에 포함된 아미노기 사이의 아마이드 결합인 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물.

8

제1항에 있어서, 상기 양자점은 카드뮴셀레나이드(CdSe), 카드뮴설파이드(CdS), 카드뮴텔로리움(CdTe), 징크텔로리움(ZnTe), 징크셀레나이드(ZnSe), 징크설파이드(ZnS), 징크옥사이드(ZnO), 인듐 인화물(InP), 인듐 비화물(InAs), 머큐리텔로리움(HgTe) 및 머큐리셀레나이드(HgSe) 중에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물.

9

제1항에 있어서, 상기 인플루엔자 바이러스 항체는 H1N1형, H5N3형, H7N7형, H9N2형 또는 H5N1형 인플루엔자 바이러스를 특이적으로 인식하는 항체인 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물.

10

제1항에 있어서, 상기 친수성 화합물은 시스테아민(cysteamine), 머캅토숙신산(mercaptosuccinic acid), 머캅토프로피온산(mercaptopropionic acid), 글루타티온(glutathion), 시스테인(cysteine) 및 티올-함유 실란 중에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물.

11

(a) 양자점(quantum dots; QDs)의 표면을 친수성 화합물로 코팅하는 단계;(b) 상기 친수성 화합물이 코팅된 양자점과 라텍스 비드를 아마이드 결합반응을 통해 결합시키는 단계; (c) 상기 양자점이 결합된 라텍스 비드의 표면에 존재하는 아미노기와 숙신산무수물(succinic anhydride)을 반응시켜 상기 라텍스 비드 표면을 카르복실기로 치환하는 단계; 및(d) 상기 단계 (c)에서 치환된 라텍스 비드 표면의 카르복실기와 인플루엔자 바이러스 항체에 포함된 아미노기를 아마이드 결합반응을 통해 결합시킨 후, 원심분리하여 양자점-라텍스 비드-인플루엔자 바이러스 항체 복합체를 수득하는 단계;를 포함하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물의 제조방법.

12

제11항에 있어서, 상기 단계 (b) 및 (d)의 아마이드 결합반응은 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보디이미드(EDC) 및 N-하이드록시설포숙신이미드(Sulfo-NHS)의 존재하에 수행되는 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물의 제조방법.

13

제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물을 포함하는 인플루엔자 바이러스 검출용 키트.

14

제13항에 있어서, 상기 인플루엔자 바이러스 검출용 키트는 시료를 주입하는 시료 주입부; 상기 시료 주입부로 부터 일정 간격 이격된 지점에 위치하는 시료 내의 인플루엔자 바이러스 항원과 결합하는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물을 포함하는 인플루엔자 바이러스 항원의 결합부; 상기 결합부로부터 일정간격이 이격된 위치에 상기 인플루엔자 바이러스의 특이적 항체가 고정된 검사선(test line); 및 항-마우스 IgG가 고정된 대조선(control line)이 순차적으로 구비되는 것을 특징으로 하는 테스트 스트립 형태의 인플루엔자 바이러스 검출용 키트.

15

제14항에 있어서, 상기 인플루엔자 바이러스 항원의 결합부는 인플루엔자 바이러스 검출용 조성물을 0.2×10-6~1.0×10-5nmole의 양으로 포함하는 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 키트.

16

제14항에 있어서, 상기 시료는 사람 또는 동물의 비후강 또는 분변인 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출용 키트.

17

제14항의 인플루엔자 바이러스 검출용 키트에 인플루엔자 바이러스를 함유하는 것으로 의심되는 시료를 투입하여 상기 테스트 스트립의 검사선과 대조선에 형광빛 띠가 나타나면, 인플루엔자 바이러스 감염을 양성으로 판정하고, 대조선에만 형광빛 띠가 나타나면, 인플루엔자 바이러스 감염을 음성으로 판정하는 것을 특징으로 하는 인플루엔자 바이러스 검출 방법.