2,3-부탄디올 생산용 메탄자화균 형질전환체
Engineered methanotrophs for producing 2,3-BOD
특허 요약
본 발명은 메탄자화균의 일종인 메틸로마이크로븀 알칼리필룸 20Z(Methylomicrobium alcaliphilum 20Z) 균주에, 클렙시엘라 뉴모니애(Klebsiella pneumoniae) 균주 유래 ALDC(α-acetolactate decarboxylase)를 코딩하는 유전자 및 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) 균주 유래 ALS(α-acetolactate synthase)를 코딩하는 유전자가 도입되어, 메탄 또는 메탄올로부터 2,3-부탄디올(2,3-butanediol, 2,3-BDO)을 생산할 수 있는 형질전환체, 상기 형질전환체를 포함하는 2,3-BDO 생산용 조성물, 상기 조성물을 포함하는 2,3-BDO 생산용 키트 및 상기 형질전환체를 이용하여 2,3-BDO를 생산하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 형질전환체를 이용하면, 보다 효과적으로 대기중의 메탄 또는 배지중의 메탄올로부터 2,3-부탄디올을 생성할 수 있으므로, 2,3-부탄디올의 경제적인 생산에 널리 활용될 수 있을 것이다.
청구항
번호청구항
13

(a) 제1항 및 제5항 내지 제10항 중 어느 한 항의 형질전환체를 메탄 또는 메탄올을 공급하는 조건에서 배양하여 배양물을 수득하는 단계; 및, (b) 상기 수득한 배양물로부터 2,3-부탄디올을 회수하는 단계를 포함하는, 2,3-부탄디올 생산방법.

1

메틸로마이크로븀 알칼리필룸 20Z(Methylomicrobium alcaliphilum 20Z) 균주에, 클렙시엘라 속(Klebsiella sp.) 균주 유래 ALDC(α-acetolactate decarboxylase)를 코딩하는 budA 유전자 및 바실러스 속(Bacillus sp.) 균주 유래 ALS(α-acetolactate synthase)를 코딩하는 budB 유전자가 도입되고, MDH(malate dehydrogenase)를 코딩하는 mdh 유전자, ACKr(acetyl kinase)를 코딩하는 ack 유전자, LDH(lactate dehydrogenase)를 코딩하는 ldh 유전자가 불활성화된, 메탄 또는 메탄올로부터 2,3-부탄디올(2,3-butanediol, 2,3-BDO)을 생산할 수 있는 형질전환체.

2

삭제

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5

제1항에 있어서,상기 클렙시엘라 속 균주는 클렙시엘라 뉴모니애(Klebsiella pneumoniae) 균주인 것인, 형질전환체.

6

제1항에 있어서,상기 ALDC를 코딩하는 budA 유전자는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 것인, 형질전환체.

7

제1항에 있어서,상기 바실러스 속 균주는 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) 균주인 것인, 형질전환체.

8

제1항에 있어서,상기 ALS를 코딩하는 budB 유전자는 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것인, 형질전환체.

9

제1항에 있어서,상기 ALDC를 코딩하는 budA 유전자와 ALS를 코딩하는 budB 유전자는 Ptac 프로모터를 포함하는 벡터를 이용하여 메틸로마이크로븀 알칼리필룸 20Z 균주에 도입되는 것인, 형질전환체.

10

제9항에 있어서,상기 벡터는 pAWP89 벡터인 것인, 형질전환체.

11

제1항 및 제5항 내지 제10항 중 어느 한 항의 형질전환체 또는 그의 배양산물을 포함하는, 2,3-부탄디올(2,3-butanediol, 2,3-BDO) 생산용 조성물.

12

제11항의 2,3-부탄디올 생산용 조성물을 포함하는 2,3-부탄디올(2,3-butanediol, 2,3-BDO) 생산용 키트.