광유전자를 이용한 파킨슨병 동물 모델 및 이의 용도
Parkinson`s disease animal model using optogenetics and uses thereof
특허 요약
본 발명은 뇌 흑질에서의 할로로돕신(halorhodopsine)에 광자극을 주어 활성을 유도한 파킨슨병 동물 모델, 이의 제조 방법 및 이의 용도에 관한 것이다. 본 발명에 따른 파킨슨병 동물 모델은 뇌 흑질에서 광유전자인 할로로돕신의 발현을 통해 광자극이 주어졌을 때, 활성화된 할로로돕신이 흑질 신경세포를 억제하는 역할을 통해 파킨슨병의 증상을 나타낼 수 있다.
청구항
번호청구항
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제 8항 또는 제 9항에 있어서, 상기 단계 iii)의 파킨슨병 증상 수준은 보행 증상의 이상 수준 확인; 및 뇌 조직 내 티로신 수산화효소의 발현 수준 확인을 통해 판단하는 것을 특징으로 하는, 파킨슨병 치료 또는 예방용 후보물질의 스크리닝 방법.

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i) 할로로돕신(halorhoposin) 발현용 벡터를 포함하는 바이러스를 제조하는 단계;ii) 상기 단계 i)에서 제조한 바이러스를 동물의 뇌 흑질에 주입하여 할로로돕신의 발현을 유도하는 단계; 및iii) 상기 단계 ii)에서 유도한 동물의 뇌 흑질에 광자극기를 이식하는 단계;를 포함하는, 파킨슨병 동물 모델의 제조 방법.

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제 1항에 있어서, 상기 파킨슨병 동물 모델의 제조 방법은 iv) 상기 단계 iii)에서 광자극기를 이식한 동물에 광자극을 주는 단계;를 추가로 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 파킨슨병 동물 모델의 제조 방법.

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제 1항에 있어서, 상기 단계 iii)의 광자극의 세기는 5 내지 150 ms의 광폭 및 1 내지 100 Hz의 광빈도를 주어 조절하는 것을 특징으로 하는, 파킨슨병 동물 모델의 제조 방법.

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제 1항에 있어서, 상기 동물은 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지 및 염소로 이루어진 군에서 선택된 하나인 것을 특징으로 하는, 파킨슨병 동물 모델의 제조 방법.

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제 1항의 방법으로 제조된, 파킨슨병 동물 모델.

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i) 제 5항의 파킨슨병 동물 모델에 광자극을 주는 단계; 및ii) 상기 단계 i)에서 광자극을 준 동물 모델의 파킨슨병 증상 수준을 판단하는 단계;를 포함하는, 동물 모델을 파킨슨병의 모델로 사용하는 방법.

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제 6항에 있어서, 상기 단계 ii)의 파킨슨병 증상 수준은 보행 증상의 이상 수준 확인; 또는 뇌 조직 내 티로신 수산화효소(tyrosine hydroxylase, TH)의 발현 수준 확인을 통해 판단하는 것을 특징으로 하는, 동물 모델을 파킨슨병의 모델로 사용하는 방법.

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i) 제 5항의 파킨슨병 동물 모델에 광자극을 주는 단계;ii) 상기 단계 i)에서 광자극을 준 동물 모델에 시험 물질을 처리하는 단계;iii) 상기 단계 ii)에서 처리한 동물 모델에서 파킨슨병 증상의 수준을 확인하는 단계; 및iv) 상기 단계 iii)에서 확인한 결과를 대조군과 비교하여, 파킨슨병 증상의 완화를 나타내는 물질을 선별하는 단계;를 포함하는, 파킨슨병 치료 또는 예방용 후보물질의 스크리닝 방법.

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i) 제 5항의 동물 모델에 시험 물질을 처리하는 단계;ii) 상기 단계 i)에서 처리한 동물 모델에 광자극을 주는 단계;iii) 상기 단계 ii)에서 광자극을 준 동물 모델에서 파킨슨병 증상의 수준을 확인하는 단계; 및iv) 상기 단계 iii)에서 확인한 결과를 대조군과 비교하여, 파킨슨병 증상의 완화를 나타내는 물질을 선별하는 단계;를 포함하는, 파킨슨병 치료 또는 예방용 후보물질의 스크리닝 방법.

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제 8항 또는 제 9항에 있어서, 상기 단계 iv)의 대조군은 하기 (a) 내지 (d)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 파킨슨병 치료 또는 예방용 후보물질의 스크리닝 방법:(a) 제 5항의 파킨슨병 동물 모델에 광자극을 주지 않은 비자극 대조군;(b) 정상 동물 대조군;(c) 제 5항의 파킨슨병 동물 모델에 시험 물질을 처리하지 않은 미처리 대조군; 및(d) 할로로돕신 발현을 유도하지 않고 광자극을 준 미발현 대조군.