5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주 및 이를 이용한 5-하이드록시발레르산 생산방법
Recombinant Corynebacterium glutamicum strain for producing 5-hydroxyvaleric acid and a method of producing glutaric acid using the same
특허 요약
본 발명은 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주 및 이를 이용한 5-하이드록시발레르산 생산방법에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
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제1항에 있어서, 상기 알데하이드 리덕테아제는 알데하이드 리덕테아제 YqhD이고, 상기 알데하이드 리덕테아제 YqhD를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열번호 6의 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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제3항에 있어서, 상기 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주는 davT, davB 및 davA 를 포함하는 pCES208 발현벡터; 및 YahK가 포함된 pBL712 발현벡터로 형질전환된 것인, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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5-아미노발레이트 아미노트랜스퍼라제(5-aminovalerate aminotransferase; DavT)를 코딩하는 DavT 유전자, 라이신-2-모노옥시게나아제(lysine 2-monooxygenase; DavB)를 코딩하는 DavB 유전자, 델타-아미노발레르아미다아제(deltaaminovaleramidase; DavA)를 코딩하는 DavA 유전자 및 알데하이드 리덕테아제를 코딩하는 유전자가 도입된, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주로서,상기 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주는 숙시네이트 세미알데하이드 디하이드로게나제를 코딩하는 내생의 유전자 gabD가 결손 또는 약화된, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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삭제

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제1항에 있어서, 상기 5-아미노발레이트 아미노트랜스퍼라제(5-aminovalerate aminotransferase; DavT), 상기 라이신-2-모노옥시게나아제(lysine 2-monooxygenase; DavB) 및 상기 델타-아미노발레르아미다아제(deltaaminovaleramidase; DavA)를 코딩하는 뉴클레오티드를 포함하는 제1벡터; 및 상기 알데하이드 리덕테아제를 코딩하는 뉴클레오티드를 포함하는 제2벡터로 형질전환된 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주로서,상기 코리네박테리움 글루타미쿰 균주는 내생의 gabD 유전자가 결손 또는 약화된, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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제1항에 있어서, 상기 알데하이드 리덕테아제는 알데하이드 리덕테아제 YihU, 알데하이드 리덕테아제 YahK, 및 알데하이드 리덕테아제 YqhD로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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제3항에 있어서, 상기 제1벡터는 히스티딘-태그(polyhistidine-tag, His-tag)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 추가로 포함하는 것인, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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제5항에 있어서, 상기 히스티딘-태그는 DavB를 코딩하는 뉴클레오티드 서열(davB)의 N-말단에 위치하는 것인, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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제1항에 있어서, 상기 DavT 를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열번호 1의 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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제1항에 있어서, 상기 DavB를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열번호 2의 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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제1항에 있어서, 상기 DavA를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열번호 3의 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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제1항에 있어서, 상기 코리네박테리움 글루타미쿰 균주는 코리네박테리움 글루타미쿰 PKC인 것인, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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제1항에 있어서, 상기 알데하이드 리덕테아제는 알데하이드 리덕테아제 YihU이고, 상기 알데하이드 리덕테아제 YihU를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열번호 4의 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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제1항에 있어서, 상기 알데하이드 리덕테아제는 알데하이드 리덕테아제 YahK이고, 상기 알데하이드 리덕테아제 YahK 를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열번호 5의 뉴클레오티드 서열을 포함하는, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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5-아미노발레이트 아미노트랜스퍼라제(5-aminovalerate aminotransferase; DavT), 라이신-2-모노옥시게나아제(lysine 2-monooxygenase; DavB), 델타-아미노발레르아미다아제(deltaaminovaleramidase; DavA) 및 알데하이드 리덕테아제의 활성이 강화된, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주로서,상기 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주는 숙시네이트 세미알데하이드 디하이드로게나제의 활성이 감소 또는 불활성화된, 5-하이드록시발레르산 생산용 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주.

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삭제

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제1항, 및 제3항 내지 제15항 중 어느 한 항의 재조합 코리네박테리움 글루타미쿰 균주를 배양하여 배양물을 수득하는 단계를 포함하는, 5-하이드록시발레르산 생산방법.

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제17항에 있어서, 상기 수득한 배양물로부터 5-하이드록시발레르산을 회수하는 단계를 더 포함하는, 5-하이드록시발레르산 생산방법.

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제17항에 있어서, 상기 배양은 유가식 배양인, 5-하이드록시발레르산 생산방법.