형질전환된 대장균을 이용한 4-하이드록시발레르산의 생산 방법
METHOD FOR PRODUCING 4-HYDROXYVALERIC ACID USING TRANSFORMED E. COLI
특허 요약
본 발명은 infA 유전자, HpdR 전사인자를 코딩하는 유전자, PhpdH 프로모터, 3-하이드록시부티레이트 탈수소효소(3HBDH)를 코딩하는 유전자 및 포름산염 탈수소효소(CbFDH)를 코딩하는 유전자를 포함하는 대장균용 발현 카세트, 상기 발현 카세트를 포함하는 발현 벡터, 및 상기 발현 벡터를 포함하는 형질 전환체에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 infA 유전자를 대장균의 게놈 DNA로부터 제거하는 단계 및 infA 유전자, HpdR 전사인자를 코딩하는 유전자, PhpdH 프로모터, 3-하이드록시부티레이트 탈수소효소(3HBDH)를 코딩하는 유전자 및 포름산염 탈수소효소(CbFDH)를 코딩하는 유전자를 포함하는 대장균을 레불린산의 존재 하에 배양하는 단계를 포함하는, 4-하이드록시발레르산의 생산방법에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
1

infA 유전자;HpdR 전사인자를 코딩하는 유전자;PhpdH 프로모터;3-하이드록시부티레이트 탈수소효소(3HBDH)를 코딩하는 유전자; 및포름산염 탈수소효소(CbFDH)를 코딩하는 유전자를 포함하는, 대장균용 발현 카세트.

2

제1항에 있어서, infA 유전자는 서열번호 1로 표시되는 염기서열을 포함하는 것인 대장균용 발현 카세트.

3

제1항에 있어서, HpdR 전사인자는 서열번호 2로 표시되는 염기서열을 포함하는 것인 대장균용 발현 카세트.

4

제1항에 있어서, PhpdH 프로모터는 서열번호 3으로 표시되는 염기서열을 포함하는 것인 대장균용 발현 카세트.

5

제1항에 있어서, 3-하이드록시부티레이트 탈수소효소(3HBDH)를 코딩하는 유전자는 서열번호 4로 표시되는 염기서열을 포함하는 것인 대장균용 발현 카세트.

6

제1항에 있어서, 포름산염 탈수소효소(CbFDH)를 코딩하는 유전자는 서열번호 5로 표시되는 염기서열을 포함하는 것인 대장균용 발현 카세트.

7

제1항에 있어서, 상기 대장균은 대장균 MG1655인 대장균용 발현 카세트.

8

제1항의 발현 카세트를 포함하는 발현 벡터.

9

제8항의 발현 벡터를 포함하는 형질 전환체.

10

infA 유전자를 대장균의 게놈 DNA로부터 제거하는 단계; 및infA 유전자, HpdR 전사인자를 코딩하는 유전자, PhpdH 프로모터, 3-하이드록시부티레이트 탈수소효소(3HBDH)를 코딩하는 유전자 및 포름산염 탈수소효소(CbFDH)를 코딩하는 유전자를 포함하는 대장균을 레불린산의 존재 하에 배양하는 단계를 포함하는, 4-하이드록시발레르산의 생산방법.

11

제10항에 있어서, 무항생제 조건 하에서 수행되는 것인, 4-하이드록시발레르산의 생산방법.

12

제10항에 있어서, hpdR mRNA의 5'-UTR(비번역부위)이 750배 또는 1000배 높은 번역 수준을 나타내도록 조작하는 단계를 포함하는 4-하이드록시발레르산의 생산방법.