| 번호 | 청구항 |
|---|---|
| 1 | HpdR 전사인자를 코딩하는 유전자 및 PhpdH 프로모터를 포함하고, 상기 HpdR 전사인자를 코딩하는 유전자인 hpdR의 5'UTR이 변형된 재조합 발현 벡터로서,상기 재조합 발현 벡터는 대장균 또는 슈도모나스 푸티다에 도입되며,상기 재조합 발현 벡터가 대장균에 도입되는 경우, 상기 변형된 5'UTR은 서열번호 6으로 표시되는 염기 서열 및 서열번호 7로 표시되는 염기 서열 중 적어도 하나를 포함하고,상기 재조합 발현 벡터가 슈도모나스 푸티다에 도입되는 경우, 상기 변형된 5'UTR은 서열번호 6으로 표시되는 염기 서열을 포함하는, 재조합 발현 벡터. |
| 2 | 삭제 |
| 3 | 제1항에 있어서,상기 재조합 발현 벡터가 대장균에 도입되는 경우, 상기 재조합 발현 벡터는 대장균 유래의 유전자 infA를 포함하는, 재조합 발현 벡터. |
| 4 | 삭제 |
| 5 | 삭제 |
| 6 | 제1항의 재조합 발현 벡터를 포함하는 형질전환 대장균. |
| 7 | 제6항에 있어서,상기 형질전환 대장균 제조에 사용되는 대장균은 대장균 유전체 내의 infA가 결실된 것인, 형질전환 대장균. |
| 8 | 제1항의 재조합 발현 벡터를 포함하는 형질전환 슈도모나스 푸티다. |
| 9 | 제8항에 있어서,상기 형질전환 슈도모나스 푸티다 제조에 사용되는 슈도모나스 푸티다는 P. putida KT2440 균주인, 형질전환 슈도모나스 푸티다. |
| 10 | 제6항의 형질전환 대장균 또는 제8항의 형질전환 슈도모나스 푸티다를 레불린산 또는 3-하이드록시프로피온산의 존재 하에 배양하는 단계를 포함하는, 유전자 발현 방법. |
| 11 | 제10항에 있어서,상기 레불린산의 농도는 0.01mM 내지 70mM인, 방법. |
| 12 | 제10항에 있어서,상기 3-하이드록시프로피온산의 농도는 0.01mM 내지 70mM인, 방법. |
| 13 | 제10항에 있어서,hpdR의 5'UTR이 변형되지 않은 HpdR/PhpdH 발현 벡터로 형질전환된 대장균 대비 레불린산 또는 3-하이드록시프로피온산의 존재 하에 배양된 상기 형질전환 대장균은 목적 단백질의 발현 수준이 1.2배 내지 5배 증가되는, 방법. |
| 14 | i) PhpdH 프로모터에 의해 발현이 조절되는 3-하이드록시부티레이트 디하이드로게나제(3HBDH*) 및 NAD+-의존성 포메이트 디하이드로게나제(CbFDH)를 포함하는 제1항의 재조합 발현 벡터를 포함하는 형질전환 대장균을 배양하는 단계; 및 ii) 상기 형질전환 대장균으로부터 생산되는 4-하이드록시발레르산을 수득하는 단계를 포함하는, 4-하이드록시발레르산의 생산 방법. |
| 15 | 제14항에 있어서,상기 배양은 레불린산의 존재 하에 수행되는, 방법. |
| 16 | 제15항에 있어서,상기 레불린산의 농도는 5mM 내지 70mM인, 방법. |