4-하이드록시발레르산을 생산하는 형질전환된 슈도모나스 푸티다
RECOMBINANT PSEUDOMONAS PUTIDA PRODUCING 4-HYDROXYVALERATE
특허 요약
본 발명은 4-하이드록시발레르산을 고농도로 생산하기 위해 유전자 변형을 시킨 재조합 미생물 슈도모나스 푸티다(Pseudomonas putida)에 관한 것이다. 본 발명의 LvaAB 유전자의 발현이 억제되고, TesB 유전자가 과발현된 형질전환된 슈도모나스 푸티다 균주로부터 47 g/L의 4HV를 수득하였다. 이는 현재까지 재생 가능한 저비용 공급원료인 레불린산으로부터 수득 가능한 4HV의 생산량 중 가장 높은 생산량이다. 상기 증가된 생산율은 기질 또는 중간체를 중심 대사물질로 완전히 이화시킬 수 없는 균주를 구축함으로써 수득되었다. 본 발명에 따른 형질전환된 재조합 미생물은 외부 유도제를 필요로 하지 않고, 비용 효율적이며, 공정이 용이하고, 산업적 규모로의 확장이 가능하다. 본 발명의 형질전환된 재조합 미생물은 기질로부터 4HV를 대량 생산하는데 활용될 수 있다.
청구항
번호청구항
1

LvaAB 유전자의 발현이 억제되고, TesB 유전자가 과발현된 형질전환된 재조합 미생물로서, 상기 LvaAB 유전자의 발현 억제는 LvaA 유전자 및 LvaB 유전자의 발현이 모두 억제된 것이고, 상기 LvaA, LvaB 및 TesB는 각각 서열번호 1, 3 및 5의 아미노산 서열과 70% 이상의 상동성을 가지며, 상기 미생물은 슈도모나스(Pseudomonas) 균주인 것인, 재조합 미생물.

2

삭제

3

제1항에 있어서,상기 LvaA는 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 것인, 재조합 미생물.

4

제3항에 있어서,상기 서열번호 1의 아미노산을 갖는 LvaA는 서열번호 2의 염기서열에 의해 코딩되는 것인 재조합 미생물.

5

제1항에 있어서,상기 LvaB는 서열번호 3의 아미노산 서열을 갖는 것인, 재조합 미생물.

6

제5항에 있어서,상기 서열번호 3의 아미노산을 갖는 LvaB는 서열번호 4의 염기서열에 의해 코딩되는 것인 재조합 미생물.

7

제1항에 있어서,상기 TesB는 서열번호 5의 아미노산 서열을 갖는 것인, 재조합 미생물.

8

제1항에 있어서,상기 TesB 유전자는 서열번호 6의 염기서열을 갖는 폴리뉴클레오타이드인 것인, 재조합 미생물.

9

삭제

10

제1항에 있어서,상기 슈도모나스 균주가 슈도모나스 푸티다(P.putida)인 것인, 재조합 미생물.

11

제1항에 있어서,상기 재조합 미생물은 4-하이드록시발레르산(4HV)을 생산할 수 있는 것인, 재조합 미생물.

12

제11항에 있어서,상기 재조합 미생물은 기질로 레불린산(LA)을 이용하는 것인, 재조합 미생물.

13

제1항의 재조합 미생물을 배양하는 단계; 및 상기 재조합 미생물로부터 생산되는 4-하이드록시발레르산을 수득하는 단계를 포함하는, 4-하이드록시발레르산의 제조방법.

14

제13항에 있어서,레불린산 존재하에 재조합 미생물을 배양하는 것을 특징으로 하는 것인, 제조방법.

15

제13항에 있어서,글리세롤 존재하에 재조합 미생물을 배양하는 것을 특징으로 하는 것인, 제조방법.